SP2/0小鼠骨髓瘤細胞半貼壁
SP2/0小鼠骨髓瘤細胞半貼壁
SP2/0小鼠骨髓瘤細胞半貼壁
---尚恩生物 186278592O3---
一、細胞基本屬性

細胞名稱：小鼠骨髓瘤細胞

細胞別稱：SP2/0

細胞貨號：SNL-120

細胞種屬：小鼠

生長情況：半貼壁

培養條件：IMDM+10%FBS+1%雙抗

培養環境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

二、細胞培養操作

換液周期 2-3天

培養基體積 T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml

傳代比例 1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）

傳代方法 1.輕輕吸走培養上清，留2-3ml培養基輕輕吹打細胞面吹下細胞；

2.混勻細胞，收集細胞培養基，900rpm離心3-5min，棄上清；

3.加新的完全培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里；

4.補足完全培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養；

注意事項 半貼壁細胞會附著瓶底，但貼壁不緊，輕輕吸取培養基輕輕吹打細胞面就會脫落，不需要胰酶消化。建議使用培養皿培養，更適合吹打細胞操作，吹打細胞注意盡量輕柔，不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。

三、細胞凍存操作

凍存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%完全培養基+8%DMSO(高手建議);

凍存規格 200-300萬/ml，1ml每管

凍存方法 1.離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；

2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管；

3.將凍存管轉入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉入-80度過夜，第二天轉入液氮保存

注意事項 凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案
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