ink1">神經干細胞研究產品推薦——TAKARA Cellartis®神經干細胞產品

神經科學研究包括其發育，分化以及退化的全過程，涉及結構與發育生物學，神經興奮與突觸傳導，神經退行性疾病研究等。神經干細胞（neural stem cell， NSCs）./是一類具有分裂潛能和自我更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產生神經組織的各類細胞（神經元、星型膠質細胞，少突膠質細胞等），神經干細胞在神經發育和修復受損神經組織中發揮重要作用。

     TAKARA Cellartis®干細胞培養基和試劑能夠滿足干細胞研究工作流程各部分的需求。主要包括干細胞培養基（多能干細胞/胚胎干細胞培養基，神經干細胞培養基），多能干細胞以及分化細胞（心肌細胞、肝臟細胞、胰腺細胞，定向內胚層細胞、內皮細胞），干細胞分化培養基（神經干細胞、心肌細胞、肝臟細胞等），干細胞檢測抗體（SC121,STEM121）等；

1.神經干細胞系

神經干細胞研究的啟始材料-神經干細胞

     TAKARA Cellartis 提供不同腦組織來源的神經干細胞

   1.神經干細胞 (1.5x106 cells/管)+RHB-A培養基,高度同質化；

   2.由胎兒腦組織皮質、后腦、中前腦、脊髓、顳葉分離,無遺傳修飾；

   3.適用于神經化合物的篩選，基因編輯、神經分化研究等；

 關于Cellartis 的iPS Cell to Hepatocyte Differentiation技術的專項說明，歡迎來電咨詢。

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【應用】

神經干細胞的應用主要集中以下幾方面：

一是細胞直接移植進行替代治療，移植的神經干細胞大量增殖分化，替代損傷的神經組織，重建神經傳導通路。通過神經干細胞的移植或激活體內的神經干細胞，使其分化為神經元和膠質細胞，并與已經存在的神經細胞結構整合到一起而達到治療疾病的目的。通過過度表達nurrⅠ以及Ⅰ型星形膠質細胞因子，將80%的移植神經干細胞誘導分化成多巴胺能神經元，產生了大量可供治療帕金森病的移植細胞。給新生髓鞘形成不良性顫抖小鼠的腦室內移植神經干細胞，發現可以有效地補充鞘磷脂堿性蛋白的缺乏，明顯改善顫抖癥狀。

二是以NSCs作為基因載體，攜帶治療作用的目的基因進行移植，從而達到細胞替代和基因治療的雙重作用。經過基因修飾而攜帶有外源基因的神經干細胞移植到腦內后能遷移并整合于病變部位，移植神經干細胞能長時間表達外源基因產物，如白介素-4、活性酶、神經生長因子和神經遞質等。而這些基因產物能不同程度改善動物疾病模型的癥狀或抑制腫瘤的生長，從而延長動物生存時間。

三是通過對生長因子和細胞因子的研究，誘導自身的神經干細胞分化進行神經自我修復。研究發現成年大鼠在凋亡性損失新皮質第Ⅳ層神經元后，內源性的前體細胞可在原位被誘導分化為層狀和區域特異性的神經元，并從新建立具有靶向性的、有功能的軸突投射，替代原有神經元功能。

神經干細胞應用中存在的問題及展望神經干細胞因其具有自我更新、多向分化潛能的性質，在中樞神經系統的多種疾病中都有潛在治療價值。大量的動物實驗也證實了神經干細胞移植的獲益，但迄今尚有相當多問題有待解決。先，移植后神經干細胞的增殖、分化、遷移機理還位明確，如何對神經干細胞進行的調控獲得我們需要的分化方向未能解決；其次干細胞移植的成瘤性問題；再次將神經干細胞進行轉基因，作為基因治療神經系統疾病的療效和安全性等問題仍需探討。

【目前研究】

--近日，來自卡塔爾、美國、埃及等多個的研究人員通過研究發現，在注射神經干細胞的數個月后，大鼠損傷的脊髓結構就會表現出組織再生的跡象；來自卡塔爾大學生物醫學研究中心的研究者Hany Marei表示，據估計，大約有250萬人會因多種類型事故和跌落而患上脊髓損傷，我們還需要進行更多研究來調查干細胞在治療包括脊髓損傷等多種類型神經疾病上的潛力。

研究小組從大腦嗅球結構中分離到了特殊的神經干細胞，這些干細胞能夠特異性地分化成為神經組織，當患者進行手術分離腦部腫瘤期間研究者就能夠從患者大腦中分離出嗅球結構；這項研究中，研究者先對神經干細胞進行遺傳工程化操作使其攜帶一種能夠在顯微鏡下發熒光的蛋白，隨后對這些干細胞進行培養，他們發現這些干細胞能夠分化成為多種類型的神經系統細胞。

接下來研究者將這些干細胞注射到脊髓被切斷的大鼠機體中，隨后對大鼠損傷區域的組織樣本進行定期檢測（一直持續到第八周），研究者將未接受干細胞注射大鼠的研究結果、接受干細胞注射的大鼠的相關研究、以及接受假手術（并沒有完全切除脊髓）的大鼠的研究結果進行對比，在對照組中他們并未觀察到任何組織恢復的跡象；然而在接受神經干細胞注射的損傷大鼠機體中研究者發現，這些干細胞能夠分化為三種類型神經細胞：少突神經膠質細胞、星狀細胞以及神經元細胞；星狀細胞主要負責產生保護神經細胞的保護性髓鞘結構；同時研究者還發現這些大鼠并沒有任何免疫排斥的跡象。

然而在損傷導致后肢運動癱瘓的大鼠中研究者也并未觀察到任何功能恢復或改善的跡象。本文研究結果表明，在脊髓損傷位點注射干細胞能夠幫助產生相對正常的神經元細胞以及其它神經組織元件，但后期他們還需要進行更為深入的研究來促進機體運動能力的恢復；后研究者Marei說道，其中一種可能性就是，八周時間或許并不足以幫助恢復損傷的神經束和神經回路。

2、神經干細胞培養基

1、神經干細胞培養方法

免疫磁珠分離法：將特異性單抗與磁珠包埋結合，加入細胞懸液，通過抗體抗原特異性結合原理，使目的細胞滯留在外加磁場中。從而使細胞得以分離。

組織培養法：將碎組織塊移栽到具有培養基的培養瓶壁上培養，從而獲得目的細胞。此方法屬于細胞原代培養。

無血清培養法：即應用不含血清的培養基進行細胞培養以期獲得目的細胞。

2、神經干細胞的增殖和分化

神經干細胞的增殖和分化調控是目前外各研究小組的核心研究課題。研究證實，在不同的細胞因子、生長因子以及周圍環境等因素的相互作用下，神經干細胞可向不同的終末神經細胞分化。腦源性生長因子和神經營養素一。使其更多地分化為神經元。表皮生長因子可誘導干細胞增殖并向著膠質細胞分化；堿性成纖維生長因子可誘導干細胞分化成更多的神經元。骨形成蛋白(BMP)可誘導神經千細胞向膠質細胞分化。IGF一1通過上調BMP的拮抗分子Smad6、Smad7和Noggin而刺激海馬區少突膠質細胞分化，促進神經功能恢復。睫狀神經生長因子可誘導神經干細胞向神經元方向分化。白血病抑制因子可增強神經干細胞的自我復制能力，增加Nestin陽性細胞的數量。不同的環境因子則通過轉錄因子控制神經干細胞的增殖和分化。逆轉錄病毒介導的螺旋環轉錄因子neurogenin2和Mash-1，Sox家族等均與神經干細胞的增殖和分化有關。

3、神經干細胞、神經元細胞培養基添加劑 、生長因子

在2003年前，研究者發現在貼壁培養胚胎干細胞時，需要加入兩種因子去誘導干細胞分化成為神經細胞，即N2和B27，其中Cellartis有N2添加劑。這兩種因子現在已經成為神經分化實驗中無人不知的角色。

TAKARA Cellartis ：N2培養基添加劑是一款化學成分限定的，無血清的神經干細胞培養基添加劑，是以 Bottenstein’s N-1 為基礎研發產生的。

TAKARA Cellartis ：N2培養基添加劑聯合神經干細胞基礎培養基可以用于培養神經細胞瘤細胞和神經細胞前體細胞來源的神經元細胞， 添加劑是100X的液體，可以和細胞因子如bFGF and EGF一起添加到基礎培養基中，用于神經干細胞培養。

   關于Cellartis 的iPS Cell to Hepatocyte Differentiation技術的專項說明，歡迎來電咨詢。紅榮微再（上海）生物工程技術有限公司  Mobile      Phone  

【部分培養基實驗成果】

   圖1.單層貼壁的小鼠胚胎干細胞使用小鼠神經分化培養基 NDiff® 227向神經細胞分化

     圖2.單層貼壁的小神經干細胞使用人或小鼠神經干細胞分化培養基 RHB-A向神經細胞分化

圖3.單層貼壁的小神經干細胞使用神經干細胞分化培養基RHB-A+細胞因子EGF&FGF-2維持培養的小鼠神經干細胞