血清有機磷快速液-質譜檢測方法被驗證
發布日期：2013-06-21 瀏覽次數 ：777
有機磷農藥中毒的死亡率很高,其重要原因之一是診斷不及時。日本學者Inoue等人研究驗證了一種簡單快速的新方法——液相色譜法-大氣壓電離子化-質譜測定法(LC-APCI-MS法),結果證實此方法可以有效測定進入人體血清中的10種有機磷酸鹽濃度(J Phar Biomedl Anal 2007, 44: 258)。
“液液提取”或“固體萃取”方法是目前臨床常用的有機磷酸鹽提取方法,但是對某些特殊成分的化合物如乙酰甲胺磷則無效。
Inoue等人采用即液相色譜-質譜聯用測定法(LC-MS)研究出一種簡單快速的方法用來測定急性中毒患者血清中的10種有機磷農藥濃度[乙酰甲胺磷、殺撲磷、敵敵畏、倍硫磷、苯硫磷、敵匹硫磷、甲基乙酯磷(稻豐散)、馬拉硫磷、殺螟硫磷、殺螟腈]。這10種有機磷農藥在日本使用廣泛。
具體操作程序如下:使用乙腈脫蛋白后,將每種需檢測的生物標本注入一個XTerra MS C18不銹鋼試劑盒中,采用10 mmol/L的甲酸銨-甲醇組成的溶劑進行梯度洗脫。
結果顯示,回收提取率令人滿意,回收率為血清標本的82.2%~107.2%,相對回收率為60.0%~108.1%。血清的測定范圍(LODs)為0.125~1.000 μg/ml,檢測上限為0.25~1.25 μg/ml。從這種檢測上限濃度逐漸增加到8 μg/ml時,可以觀察到很好的直線相關性。在所有實驗標本中,均值在期望濃度的20%范圍內,而且相關系數(r2)>0.9838。
大部分有機磷農藥的分析結果顯示樣本內部和批間分析的度、準確度都是令人滿意的。從對溫度的穩定性角度,對所有有機磷酸鹽分析可以發現,敵敵畏和馬拉硫磷在室溫下就可以快溶解。殺撲磷和敵匹硫磷在整個為期4周的測定期內對所有溫度都相對穩定。
該研究證實,將沉淀蛋白法作為樣本的提純程序,這種LC-MS方法快速可行,可以測定人體血清中的有機磷農藥,并且在測定血清標本中有機磷農藥時具備較高的選擇性、敏感性、度、準確度、直線性、回歸性和穩定性。因此這種簡單準確的檢測方法,可以成功地應用于臨床急性有機磷農藥中毒事件中。
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