公司主要經(jīng)營：ELISA試劑盒，生化試劑，實驗耗材，細胞，血清，培養(yǎng)基，抗體等！代理經(jīng)銷： Sigma、Amresco、invitrogen、Gibco、Hyclone、BD、Roche、GE、Merck、OXOID試劑血清及培養(yǎng)基；NUNC、corning、Axygen耗材；Abcam、santa cruz、CST、R&D抗體，細胞因子等產(chǎn)品；

上海恒渡生物科技有限公司，是一家專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè)，經(jīng)營產(chǎn)品主要包括常規(guī)生化試劑、分子生物學(xué)試劑、免疫組化坑體及細胞因子、細胞培養(yǎng)基、科研儀器及實驗室常規(guī)耗材等生物技術(shù)服務(wù)。
公司一方面注意跟蹤世界范圍分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)等生物學(xué)科的發(fā)展前沿，努力將歐美專業(yè)生產(chǎn)廠家的具有國際先進水平的產(chǎn)品推薦給各類研究人員；另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開發(fā)，推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務(wù)。公司客戶遍布大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。 公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時，也建立了一套集技術(shù)支持、物流、售后服務(wù)等多個部門的全方位的服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個客戶。

公司主營業(yè)務(wù)：
試劑盒：免疫組化試劑盒、ELISA試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒。
細胞：原裝進口細胞、國產(chǎn)腫瘤細胞、國產(chǎn)正常細胞。
耗材：細胞培養(yǎng)耗材、普通實驗耗材。
抗體：免疫組化、免疫熒光、流式細胞檢測、免疫細胞化學(xué)。
生化試劑：原裝進口生化試劑、進口分裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑。

代理經(jīng)銷：
Sigma、Amresco、Invitrogen、Gibco、Hyclone、Roche、Merck
Nunc、Corning、Axygen、abcam、santa cruz、細胞因子等產(chǎn)品；為廣大客戶帶來快捷和方便！

在科學(xué)技術(shù)飛速發(fā)展的今天，恒渡生物緊跟時代步伐，以優(yōu)良的品質(zhì)，合理的價格
全心的付出和不斷創(chuàng)新的精神為拼搏在科研一線的偉大工作者們提供全方位高品質(zhì)的服務(wù)！

Cell Counting Kit-8

目錄號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	包裝
CA1210-100	Cell Counting Kit-8	100 T	1ml
CA1210-500	Cell Counting Kit-8	500 T	5ml
CA1210-1000	Cell Counting Kit-8	1000 T	10ml
CA1210-3000	Cell Counting Kit-8	3000 T	30ml

保存：4℃密封避光保存，有效期一年。
產(chǎn)品簡介： Cell Counting Kit-8 簡稱CCK-8試劑盒，為MTT法的替代方法，是一種基于WST（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。可用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗
使用說明：
一、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（測定細胞具體數(shù)量時）
1、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量，然后接種細胞。
2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做3-5個細胞濃度梯度，每組3-6個復(fù)孔。
3、接種后培養(yǎng)至細胞貼壁，然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時間后測定OD 值，制作出一條以細胞數(shù)量為橫坐標(biāo)（X 軸），OD 值為縱坐標(biāo)（Y 軸）的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測定出未知樣品的細胞數(shù)量（試用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提是實驗的條件要一致，便于確定細胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時間。）
二、細胞活性檢測
1、在96孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（在37℃,5% CO₂的條件下）。
2、向每孔加入10μL CCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù)）。
3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時。
4、用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度。
5、如果暫時不測定OD值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。
三、細胞增值-毒性檢測
1、在96孔板中配置100 μL 的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時（在37 ℃，5% CO2的條件下）。
2、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r間（例如：6、12、24或48小時）。
3、向每孔加入10 μL CCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù)）。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉藥物影響。
4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時。
5、用酶標(biāo)儀測定在450 nm處的吸光度。
6、如果暫時不測定OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。

活力計算：.
細胞活力（％）=[A(加藥)－A(空白)]／[ A(0加藥)－A(空白)]×100
A（加藥）：具有細胞、CCK-8溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培養(yǎng)基和CCK-8溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A（0 加藥）：具有細胞、CCK-8溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
細胞活力：細胞增殖活力或細胞毒性活力
注意事項：
①建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時間。
②白細胞可能需要培養(yǎng)較長時間。
③當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96 孔板時，貼壁細胞的zui小接種量至少為1 ,000個/孔 (100 μL培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2,500 個/孔 ( 100 μL培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗，請先計算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10% 加入CCK-8溶液。
④如果沒有450nm的濾光片，可以使用吸光度在430-490 nm 之間的濾光片，但是450nm檢測靈敏度zui高。
⑤培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計算時，通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不會對檢測造成影響。
CCK-8法與其它檢測方法之間的比較：

細胞計數(shù)方法	MTT法	XTT 法	WST-1 法	CCK-8法
形成的formazan 的水溶性	差	好	好	好
產(chǎn)品性狀	粉末	2 瓶溶液	溶液	1瓶溶液
使用方法	配成溶液后使用	現(xiàn)配現(xiàn)用	無需預(yù)制	無需預(yù)制
檢測靈敏度	高	很高	很高	高
檢測時間	較長	較短	較短	短
檢測波長	560-600nm	420-480nm	420-480nm	430-490nm
細胞毒性	高，細胞形態(tài)完全消失	很低，細胞形態(tài)不變	很低，細胞形態(tài)不變	很低，細胞形態(tài)不變
試劑穩(wěn)定性	一般	較差	一般	很好
大批量樣品檢測	可以	非常適合	非常適合	非常適合
便捷程度	一般	便捷	便捷	非常便捷

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