北京大有泰萊生物技術(shù)有限公司專業(yè)生產(chǎn)非洲豬瘟（Taqman探針一步法實(shí)時(shí)熒光RT-PCR），操作便捷，靈敏度高，特異性好，臨床樣本符合率達(dá)到98%以上，得到使用客戶的一致好評(píng)。是值得信賴的口碑產(chǎn)品

北京大有泰萊生物技術(shù)有限公司成立于2014年10月，是注冊(cè)在中關(guān)村科技園區(qū)海淀創(chuàng)業(yè)園的高科技企業(yè)。公司主要從事食品安全檢測(cè)技術(shù)和動(dòng)物疫病診斷技術(shù)的開(kāi)發(fā)和產(chǎn)品研制生產(chǎn)及銷售，擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的原料制作工藝和產(chǎn)品生產(chǎn)工藝。主要技術(shù)平臺(tái)為基于細(xì)胞技術(shù)的酶聯(lián)免疫技術(shù)和分子生物學(xué)PCR檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)。即通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)獲得產(chǎn)品研制和生產(chǎn)所需原材料，開(kāi)發(fā)出各種酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，和通過(guò)基因合成獲得引物和探針，進(jìn)而開(kāi)發(fā)出各種PCR檢測(cè)試劑。其他相關(guān)技術(shù)為光機(jī)電一體化、移動(dòng)互聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、云存儲(chǔ)及物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)等。主要產(chǎn)品為食品安全殘留（抗生素、激素、違禁添加物等）檢測(cè)試劑盒和目前農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)監(jiān)控的動(dòng)物疫病檢測(cè)試劑盒，前者主要用酶聯(lián)免疫技術(shù)，后者主要用酶聯(lián)免疫技術(shù)和PCR技術(shù)，主要面對(duì)客戶為經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖企業(yè)、屠宰企業(yè)、政府食品安全及動(dòng)物疫病監(jiān)管部門(mén)，市場(chǎng)區(qū)域覆蓋全國(guó)各省市縣，將來(lái)計(jì)劃將產(chǎn)品輻射到中東和東南亞地區(qū)。 北京大有泰萊生物技術(shù)有限公司傳承業(yè)內(nèi)診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)的經(jīng)驗(yàn)，借鑒和學(xué)習(xí)國(guó)際先進(jìn)技術(shù)，不僅在多個(gè)技術(shù)領(lǐng)域如：酶聯(lián)免疫技術(shù)、PCR技術(shù)、免疫親和層析、免疫磁珠、數(shù)字PCR技術(shù)、二代測(cè)序技術(shù)等均有較強(qiáng)的技術(shù)儲(chǔ)備，而且還相應(yīng)開(kāi)發(fā)出了一系列的具有國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力的檢測(cè)診斷產(chǎn)品。公司引進(jìn)國(guó)外先進(jìn)的產(chǎn)品考評(píng)體系和生產(chǎn)環(huán)節(jié)質(zhì)量控制體系，保障了診斷試劑的批量供應(yīng)和高標(biāo)準(zhǔn)的品質(zhì)。目前公司已成功開(kāi)發(fā)產(chǎn)品20余種，多個(gè)產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)屬業(yè)內(nèi)領(lǐng)先。公司和國(guó)內(nèi)外多個(gè)國(guó)家和地方科研單位和實(shí)驗(yàn)室廣泛開(kāi)展合作，團(tuán)隊(duì)成員專業(yè)覆蓋面廣，技術(shù)實(shí)力強(qiáng)。除了傳統(tǒng)的獸醫(yī)學(xué)、微生物學(xué)、藥物化學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、光機(jī)電等學(xué)科外，公司創(chuàng)始團(tuán)隊(duì)還融合了其他多個(gè)學(xué)科專業(yè)，如互聯(lián)網(wǎng)、移動(dòng)信息技術(shù)、云存儲(chǔ)、大數(shù)據(jù)等IT專業(yè)技術(shù)以及3D打印、納米材料等其他材料及成型技術(shù)。所開(kāi)發(fā)產(chǎn)品受到國(guó)內(nèi)外用戶的一致好評(píng)。公司從創(chuàng)辦伊始就確立了以自主創(chuàng)新為基礎(chǔ)、以市場(chǎng)為導(dǎo)向、以客戶為中心、以員工為根本的管理思想。公司集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、技術(shù)培訓(xùn)于一體，通過(guò)團(tuán)隊(duì)協(xié)作與相互信任，實(shí)現(xiàn)高效運(yùn)轉(zhuǎn)和市場(chǎng)多贏。公司擁有優(yōu)秀的人才隊(duì)伍、先進(jìn)的儀器設(shè)備、規(guī)范化的生產(chǎn)和管理，為一流的產(chǎn)品提供了有力保障。公司將乘政策東風(fēng)而上，緊密結(jié)合市場(chǎng)的訊息，在廣大用戶和合作伙伴的支持下，我們必將倍加努力，為百姓食品安全做出更好的貢獻(xiàn)。

規(guī)格：50頭份

介紹：非洲豬瘟(African Swine fever，East African Swine fever,ASF)，是一種急性，發(fā)熱傳染性很高的濾過(guò)性病毒所引起的豬病，其特征是發(fā)病過(guò)程短，但死亡率高達(dá)，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱，皮膚發(fā)紺，淋巴結(jié)，腎，胃腸粘膜明顯出血。衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須通報(bào)疾病。

用途：該試劑盒用于對(duì)ASF進(jìn)行檢測(cè)，有助于對(duì)ASF的實(shí)驗(yàn)室診斷、監(jiān)測(cè)和流行病調(diào)查。

原理：本試劑盒采用一步法實(shí)時(shí)熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(One-Step Real Time RT-PCR) ，結(jié)合Taqman技術(shù)，對(duì)特異核酸進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。

試劑盒的組成

試劑名稱	數(shù)量
ASF反應(yīng)液	550μL×1管
ASF酶	40μL×1管
ASF引物探針	100μL×1管
無(wú)核酸水	1000μL×1管
ASF陰性對(duì)照	1000μL×1管
ASF陽(yáng)性對(duì)照	150μL×1管

保存期及貯藏條件：本產(chǎn)品-20℃避光可保存12個(gè)月。

樣品收集，操作和儲(chǔ)存

1. 選擇發(fā)病早期，無(wú)菌采樣并立即送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒檢測(cè)。

2. 樣品短期可在4℃冷藏保存，較長(zhǎng)時(shí)間保存應(yīng)在--20℃或者-70℃，并且避免反復(fù)凍融。

檢測(cè)步驟

1.核酸提取

樣品進(jìn)行適當(dāng)處理后，可采用本公司的核酸提取試劑盒，該試劑盒可用于對(duì)樣本中病毒RNA的提取，請(qǐng)按照提取試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。也可選擇其他合適的商品化產(chǎn)品。

2.擴(kuò)增試劑的準(zhǔn)備

將樣品數(shù)+1份陰性對(duì)照+1份陽(yáng)性對(duì)照設(shè)為N，計(jì)算試劑所需量，反應(yīng)體系配制見(jiàn)下表

試劑名稱	N份用量（20μL 體系）
ASF反應(yīng)液	10μL×（N+1）
ASF酶	0.5μL×（N+1）
ASF引物探針	1.8μL×（N+1）
無(wú)核酸水	5.7μL×（N+1）

將各試劑按照表中用量加入無(wú)菌離心管中，充分混勻，短暫離心后在PCR反應(yīng)管中分別加入18μL混合液。

3.加樣

將制備好的樣本，陰性對(duì)照，陽(yáng)性對(duì)照各取2μL分別加入對(duì)應(yīng)反應(yīng)管中，加完后蓋緊PCR反應(yīng)管蓋，置于PCR儀上。

4.熒光PCR擴(kuò)增與信號(hào)收集

循環(huán)數(shù)	溫度（℃）	時(shí)間	數(shù)據(jù)收集位點(diǎn)
1	45	15min	-
1	95	2min	-
40	95	15s	-
	60	1min	數(shù)據(jù)收集

注：報(bào)告基團(tuán)選FAM,淬滅基團(tuán)選NONE。

結(jié)果成立原則

陽(yáng)性對(duì)照：CT值＜30并有明顯的擴(kuò)增曲線。

陰性對(duì)照：無(wú)CT值或者CT值>37，線性為直線或者輕微斜線，無(wú)明顯擴(kuò)增曲線。

以上要求需同時(shí)滿足，否則本次實(shí)驗(yàn)無(wú)效，需要重新進(jìn)行。

結(jié)果判定

CT值	樣本檢測(cè)結(jié)果
<30并有明顯的擴(kuò)增曲線	陽(yáng)性，樣本中檢測(cè)出ASF。
30-37	可疑，需重復(fù)檢測(cè)。若第二次檢測(cè)CT值仍為30-37并有明顯擴(kuò)增曲線則判定為陽(yáng)性，否則為陰性。
>37并無(wú)擴(kuò)增曲線	陰性，樣本中未檢測(cè)出ASF。

注意事項(xiàng)

1.反應(yīng)體系應(yīng)在特定配液區(qū)或者超凈工作臺(tái)中配制，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格控制污染。

2.PCR整個(gè)試驗(yàn)分配液區(qū)、模板提取區(qū)、擴(kuò)增區(qū)。流程順序?yàn)榕湟簠^(qū)→模板提取區(qū)→擴(kuò)增區(qū)。嚴(yán)禁器材和試劑倒流。

3.使用不含熒光物質(zhì)的一次性手套，一次性離心管。

4.反復(fù)凍融試劑將減低檢測(cè)靈敏度，本試劑盒應(yīng)在5次內(nèi)用完.

5.-20℃保存的各試劑管使用前應(yīng)在室溫下完全融化，液體融化后需徹底混勻，2000 rpm離心15 s ，使用后立即放回-20 ℃。

6.在RNA提取過(guò)程中，避免RNA酶污染，盡量縮短操作時(shí)間。

7.注意防止試劑盒組分受污染。不要使用超過(guò)有效期限的試劑，試劑盒之間的成分不要混用。

8.PCR反應(yīng)管避免氣泡存在，管蓋需蓋緊。

9.不同批次的試劑盒勿混用。

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