特別提示:包括重組菌落鑒定試劑盒(PCR法)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:重組菌落鑒定試劑盒(PCR法)
英文名稱:Recombinant co
lony PCR Identification Kit
產(chǎn)品貨號:WH0198
產(chǎn)品規(guī)格:50次
本試劑盒包含一管便攜式PCR MasterMix預(yù)混系統(tǒng),無需您一一加入各種成分,直接加入篩選到的單菌落,經(jīng)過1小時左右的PCR反應(yīng)和電泳檢測即可得到重組菌落鑒定的結(jié)果。
PCR法鑒定重組菌落。其原理主要是選擇合適的引物,根據(jù)靈敏的PCR擴(kuò)增反應(yīng),將陽性宿主菌體內(nèi)載體的目的片段擴(kuò)增出來,方便地進(jìn)行鑒定,無需進(jìn)行菌體的過夜培養(yǎng)和質(zhì)粒提取,大大地節(jié)省了時間和精力。
產(chǎn)品特點(diǎn):
方便快捷:省去了菌體培養(yǎng)和提取質(zhì)粒的時間與費(fèi)用,快速簡便地鑒定重組子。
準(zhǔn)確靈敏:鑒定的準(zhǔn)確度達(dá)90%以上。
試劑盒組成:
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組分
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規(guī)格
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2×Taq PCR MasterMix
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500μl
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T7 primer(10μM)
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50μl
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SP6 primer(10μM)
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50μl
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ddH2O
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1ml
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保存條件:-20℃可長期保存,2×Taq PCR MasterMix多次凍融不會影活性。如需經(jīng)常使用,可存放于4℃。
注意事項(xiàng):
1.重組菌落鑒定時,挑取單菌落前,應(yīng)先做好標(biāo)記,便于鑒定后使用。
2.挑取菌落時,應(yīng)選擇單菌落,不要挑取太多菌體,以免影響PCR結(jié)果。
3.設(shè)定PCR程序時,請根據(jù)插入片段大小決定延伸時間,如果插入片段大小為1kb以下,延伸時間30sec即可,如果片段更長,可按此比例增加延伸時間。
操作步驟:
以下舉例僅供參考,實(shí)際反應(yīng)條件因模板、引物等的結(jié)構(gòu)不同而各異,需根據(jù)實(shí)際情況,設(shè)定zuì佳反應(yīng)條件。
1.按以下體系配好含有引物的PCR反應(yīng)液。
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成分
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使用量
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T7 Primer(10μM)
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1μl
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SP6 Primer(10μM)
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1μl
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2×Taq PCR MasterMix
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10 μl
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ddH2O
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8 μl
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2.將過夜培養(yǎng)的平板上的菌落編號后,使用滅菌的牙簽挑取一部分單菌落加入上述反應(yīng)液,劇烈振蕩使菌落充分分散到反應(yīng)液中。
3.短暫離心收集管中的液體后,進(jìn)行PCR反應(yīng)。
4.PCR反應(yīng)循環(huán)的設(shè)置:

注意:延伸時間請根據(jù)插入片段大小調(diào)整。
5.結(jié)果檢測:反應(yīng)結(jié)束后取5 μl反應(yīng)產(chǎn)物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。
根據(jù)您的關(guān)注的
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名稱:單細(xì)胞裂解液(DNA提取)
貨號:BTN130803
規(guī)格:1mL
本產(chǎn)品為單細(xì)胞DNA提取專用裂解液,本裂解液經(jīng)多次優(yōu)化,含有多種去污劑、變性劑和鹽,可有效抑制核酸酶在裂解過程中對核酸的破壞,維持核酸結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。純化所得DNA可用于全基因組擴(kuò)增(WGA)等實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品足夠使用200次以上。
儲存條件:低溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期兩年。
名稱:胚胎裂解液
貨號:BTN130806
規(guī)格:1mL
本產(chǎn)品是胚胎培養(yǎng)過程中分離單個胚胎細(xì)胞的裂解液。可用于分離得到不同時期的胚胎的單細(xì)胞,得到的單細(xì)胞可用于各種單細(xì)胞分析,核酸提取等實(shí)驗(yàn)。
儲存條件:低溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期兩年。
名稱:平末端DNA加A試劑盒
貨號:BTN60105
規(guī)格:50次
本產(chǎn)品利用Taq DNA polymerase的不依賴于模板的末端轉(zhuǎn)移酶活性,在只有dATP 存在的情況下,在平末端的DNA片段加上一個dA 尾巴,使平末端片段也能被T載體克隆。其流程圖如下:
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 簡單,2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要單獨(dú)準(zhǔn)備。
2.適用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.產(chǎn)物可以直接用于與T載體的連接。
試劑盒組成:
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成分
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規(guī)格
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Taq DNA polymerase(5U/μL)
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50μl
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2×Tailing Buffer
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1.25ml
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說明書
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1份
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儲存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:反應(yīng)前純化處理:
用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶擴(kuò)增得到的DNA片段,必須經(jīng)過徹底的去除殘留的酶的處理過程(如酚/lǜ仿抽提或Proteinase K處理),否則它們將在加A反應(yīng)時,切除掉加上的A尾巴,干擾反應(yīng)。可以采取膠回收和酚/lǜ仿抽提法等常規(guī)方法純化,zuì后溶解在水或TE中,終濃度以0.1μg/μL為宜。
二:加A反應(yīng)
在干凈的0.5mL或1.5mL離心管中,分別加入下列成分:
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回收的DNA片段
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0.2-2ug
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2×dA Tailing Buffer
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25μL
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Taq DNA polymerase(5U/μL)
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1μL
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補(bǔ)水到
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50μL
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72℃保溫2小時
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三:反應(yīng)后處理
加A反應(yīng)后,Taq DNA pol

關(guān)注
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貨號
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規(guī)格
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