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組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶ELISA試劑盒說明書

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  • 更新日期:2015-02-09 09:16
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詳細介紹
 組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶ELISA試劑盒說明書

本試劑僅供研究使用  標本:體液

組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶ELISA試劑盒說明書試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。

組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶ELISA試劑盒說明書自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶ELISA試劑盒說明書操作注意事項
1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶ELISA試劑盒說明書操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶ELISA試劑盒說明書性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶ELISA試劑盒說明書結果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-800pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml

 NO  豬血清一氧化氮  規格: 48T/96T

 VWF  豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子  規格: 48T/96T

 ANG-R-Tie2  豬血管生成素受體Tie2  規格: 48T/96T

 ANG-2  豬血管生成素2  規格: 48T/96T

 ANG-1  豬血管生成素1  規格: 48T/96T

 VCAM-1/CD106  豬血管內皮細胞粘附分子1  規格: 48T/96T

 VE-cad  豬血管內皮鈣粘著蛋白復合體  規格: 48T/96T

 ANG-Ⅱ  豬血管緊張素Ⅱ  規格: 48T/96T

 cTn-Ⅰ  豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ  規格: 48T/96T

 PAI-1  豬纖溶酶原激活物抑制因子1  規格: 48T/96T

 PAI  豬纖溶酶原激活物抑制因子  規格: 48T/96T

 ICAM-3/CD50  豬細胞間粘附分子3  規格: 48T/96T

 ICAM-2/CD102  豬細胞間粘附分子2  規格: 48T/96T

 HA  豬透明質酸  規格: 48T/96T

 MBP  豬髓磷脂堿性蛋白  規格: 48T/96T

 MPO  豬髓過氧化物酶  規格: 48T/96T

 OXR  豬食欲素受體  規格: 48T/96T

 OX-B  豬食欲素/阿立新B  規格: 48T/96T

 SS  豬生長抑素  規格: 48T/96T

 GHRP-Ghrelin  豬生長激素釋放肽ghrelin  規格: 48T/96T

 GHRP  豬生長激素釋放多肽  規格: 48T/96T

 GH  豬生長激素  規格: 48T/96T

 EPI  豬腎上腺素  規格: 48T/96T

 HSP-90  豬熱休克蛋白90  規格: 48T/96T

 HSP-70  豬熱休克蛋白70  規格: 48T/96T

 HSP-40  豬熱休克蛋白40  規格: 48T/96T

 HSP-20  豬熱休克蛋白20  規格: 48T/96T

 NE  豬去甲腎上腺素  規格: 48T/96T

 GLUT2  豬葡萄糖轉運蛋白2  規格: 48T/96T

 Prednisolone  豬潑尼松龍  規格: 48T/96T

 CORT  豬皮質酮/腎上腺酮  規格: 48T/96T

 Cortisol  豬皮質醇  規格: 48T/96T

 BNP  豬腦鈉素/腦鈉尿肽  規格: 48T/96T

 SGLT1  豬鈉-葡萄糖共轉運載體1  規格: 48T/96T

 eNOS-3  豬內皮型一氧化氮合成酶3  規格: 48T/96T

 eNOS  豬內皮型一氧化氮合成酶  規格: 48T/96T

 ET-1  豬內皮素1  規格: 48T/96T

 ET-1  豬內皮素1  規格: 48T/96T

 IgM  豬免疫球蛋白M  規格: 48T/96T

 IgG  豬免疫球蛋白G  規格: 48T/96T

 IgE  豬免疫球蛋白E  規格: 48T/96T

 PEDV  豬流行性腹瀉病毒抗體  規格: 48T/96T

 pERK  豬磷酸化細胞外信號調節激酶  規格: 48T/96T

 sVCAM-1  豬可溶性血管細胞粘附分子1  規格: 48T/96T

 VEGFR-2/sFLK-1  豬可溶性血管內皮生長因子受體2  規格: 48T/96T

 sICAM-1  豬可溶性細胞間粘附分子1  規格: 48T/96T

 sP-Selectin  豬可溶性P選擇素  規格: 48T/96T

 ATR  豬抗凝血酶受體  規格: 48T/96T

 MIP-1α/CCL3  豬巨噬細胞炎性蛋白1α  規格: 48T/96T

 KGF  豬角化細胞生長因子  規格: 48T/96T

 TIMP-1  豬基質金屬蛋白酶抑制因子1  規格: 48T/96T

 MMP-9  豬基質金屬蛋白酶9  規格: 48T/96T

 MMSAM  豬黑色素瘤轉移表面黏附分子  規格: 48T/96T

 OT/BGP  豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白  規格: 48T/96T

 T  豬睪酮  規格: 48T/96T

 MHB  豬高鐵血紅蛋白  規格: 48T/96T

 HGF  豬肝細胞生長因子  規格: 48T/96T

 SP-A  豬肺表面活性物質相關蛋白A  規格: 48T/96T

 DAO  豬二胺氧化酶  規格: 48T/96T

 TE  豬端粒酶  規格: 48T/96T

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 
 
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