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人血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒操作步驟

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  • 更新日期:2023-08-03 14:23
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詳細介紹
產品名稱:人血管生成素2(ANG-2)ELISA酶聯免疫試劑盒
英文名稱:Human Angiopoietin 2, ANG-2 Elisa Kit
規格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。

自備物品:
1.酶標儀(450nm)
2.加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱

備試劑與收集血樣:
1.  收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;長時間須冷凍( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反復凍融。
2.  標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4.  洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)

實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100?L,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100?L,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100?L,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90?L,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50?L,立即450nm讀數。

注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
11.本公司產品僅用于科研。

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