名稱:HEPES解離液
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
分類:細胞組分分離
儲存條件:4℃,6個月
用途:分離細胞核。
注意事項:主要由HEPES、硫酸鎂、氯化鉀、dtt、等組成。。
使用范圍:僅限科研使用,不能應用于臨床。
HEPES是一種Good’s緩沖試劑,中文全稱為N-2-羥乙基哌嗪-N'-2-乙磺酸。它的PH緩沖范圍在6.8到8.2區(qū)間之內(nèi)。HEPES較難溶解于其他的任何溶劑,但很容易溶解于水,而且同多價的金屬離子之間不會產(chǎn)生沉淀反應的現(xiàn)象。此外,大部分的自然因素都不會影響HEPES的解離作用,如溫度、濃度、培養(yǎng)基鹽分以及離子組成等等,由此可見HEPES穩(wěn)定性非常好。
我們需要注意的是HEPES緩沖液使用的zui終濃度為10-50mmol/L,因此它對細胞沒有任何毒性。通常在一般情況下,HEPES的濃度為20mmol/L就可以達到緩沖能力。下面就HEPES緩沖液兩種使用方法進行介紹:
第1種使用方法主要是HEPES根據(jù)所需要的一定濃度直接添加到已經(jīng)配制完成的培養(yǎng)液中,然后經(jīng)過過濾除菌的操作。在每一千毫升的培養(yǎng)液中加入2.38g的HEPES緩沖試劑,等到溶解之后使用1N的氫氧化鈉調(diào)好PH值到7.2,在進行濾過除菌后才能正常使用。這時HEPES生物緩沖液的使用濃度為10mmol/L。
第二種使用方法通常在使用前取到99毫升的培養(yǎng)液,然后加入l毫升的貯存液,此時該溶液的應用濃度還是為10mmol/L。取23.8g HEPES溶于90ml雙蒸水中,用1N的氫氧化鈉調(diào)pH至7.5到8.0范圍,開始用水定容至100ml,過濾除菌,分裝2ml的小瓶,保存條件是4℃或-20℃。這就是l mol/L(100 x)HEPES貯存液配制的方法。






