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P1158/pInt噬菌體基因質粒說明書

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  • 更新日期:2020-07-16 15:10
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詳細介紹
別名:     NM_020347.4;BBS17
復制子:     pUC
原核抗性:     Amp
克隆菌株:     DH5a
培養條件:     37度
質粒宿主:     大腸桿菌
質粒用途:     基因模板
片段類型:     cDNA
片段物種:     人
原核抗性:     Amp




一、載體分類及載體組成元件
載體分類
1、按屬性分類:病毒載體和非病毒載體
病毒載體是一種常見的分子生物學工具,可將遺傳物質帶入細胞,原理是利用病毒具有傳送其基因組進入目的細胞,進行感染的分子機制。可發生于完整活體或是細胞培養中。可應用于基礎研究、基因療法或疫苗。用于基因治療和疫苗的病毒載體應具備以下基本條件:
(1)攜帶外源基因并能包裝成病毒顆粒;
(2)介導外源基因的轉移和表達;
(3)對人體不致病;
(4)在環境中不會引起增殖和傳播。
   非病毒載體一般是指質粒DNA。


2、按進入受體細胞的類型分類:原核載體、真核載體、穿梭載體(含原核和真核2個復制子,能在原核和真核細胞中復制,并可以在真核細胞中有效表達)。
3、按功能分類:克隆載體、表達載體
克隆載體:具有克隆載體的基本元件(Ori,Ampr,MCS等),可以攜帶DNA--pian段或外源基因進入受體細胞并克隆和大量擴增DNA-pian段(外源基因)的載體。
   表達載體:克隆載體中加入一些與表達調控(具有轉錄/翻譯所必需的DNA順序)有關的元件即成為表達載體。


載體組成元件
1、復制起始位點Ori:即控制復制起始的位點。Ori的箭頭指復制方向,其他元件標注的箭頭多指轉錄方向(正向)。
2、抗生素抗性基因:可以便于加以檢測,如Amp+ ,Kan+
(1)Ampr:水解β-內酰胺環,解除氨芐的毒性。
(2)tetr :可以阻止四環素進入細胞。
(3)camr:生成氯霉素羥乙酰基衍生物,使之失去毒性。
(4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸轉移酶,使G418(卡那霉素衍生物)失活。
(5)hygr:使潮霉素β失活。
 
 
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