第八因子相關抗原（FⅧAg）ELISA試劑盒技術保存條件及有效期

1．試劑盒保存：2-8℃。

2．有效期：6個月

操作步驟

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

12μg/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

6μg/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

3μg/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

1.5μg/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

0.75μg/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10.第八因子相關抗原（FⅧAg）ELISA試劑盒終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。