核酸印跡膜染液說明書

產品編號：BTN70104

規格：100ml

產品及特點：

本產品可以對已經轉移到印跡膜上的DNA 和RNA 進行快速染色，在不需要UV 等儀器條件下確認轉膜效果?？梢杂糜赟outhern、Nothern 和堿變性膠印跡膜。它具有下列特點：

1. 環保，來于一種常用的滅菌劑。

2. 快速方便，5-10 染色即可直接照相保存或掃描保存。

3. 可逆，可被預雜交液中的SDS 洗脫，不影響后續雜交反應。

4. 靈敏度為20 ng/條帶（包括DNA 和RNA），跟EB 相當。

5. 跟各種印跡膜兼容，可用于Gene-Screen、BioTrace RP、Zeta-Probe、Nytran、Hybond、Duralon 等尼龍膜，也可用于PVDF 膜和硝酸素膜時背景稍高）。

6. 可以反復使用。

規格及成分：

保存條件：

常溫運輸和保存，有效期一年。

自備試劑：

去離子水、1×SSPE 或1×SSC 溶液。

使用方法：

1. 按常用的印跡法、電轉法等方法將電泳膠中的DNA 或RNA 轉移到印跡膜上并根據印跡膜的性質進行UV 交聯或加熱烘烤，將核酸固定。

2. 如果是RNA 甲醛變性膠的印跡膜，zui好用去離子水洗滌印跡膜30秒鐘以除去甲醛（甲醛會干擾染色）

3. 將濕潤的印跡膜浸入到裝有足夠印跡膜染液（本產品）的容器中。如果印跡膜很干，則需要先用1×SSPE 或1×SSC 溶液濕潤。

4. 室溫下輕柔搖晃染色5-10分鐘。印跡膜上DNA或RNA量大時染色時間可能不需要5分鐘，染色時間過長背景會增加。

5. 將染液倒回到試劑瓶中以備下次使用。

6. 用自備的去離子水清洗印跡膜三次，每次5-10秒。DNA 或RNA 條帶將呈現藍色，背景將呈現淡藍色。注意：洗滌時間不要太長，否則固定在印跡膜上的核酸在低鹽條件下（在去離子水中）容易脫落。

7. 用濾紙吸去多余的水份，此時可以用鉛筆在印跡膜上作標記（Southern雜交膜可以標記DNA 分子量標準的位置，Northern 雜交膜可以標記18S 和28S RNA 的位置，它們分別對應于2 Kb 和5 Kb 的大小），也可以將印跡膜放在白色背景下照相（zui好使用黃色濾光片）或者掃描以保存實驗結果。

8. 如果預雜交液中有SDS，則印跡膜不需要脫色，可以直接用于預雜交。

如果預雜交液中不含SDS，需將染色后的印跡膜浸入到含1% SDS 的1×SSPE 或1×SSC 溶液中在室溫下搖晃直到顏色脫去，一般需要15分鐘。

使用效果：

圖注：3μg總RNA 和0.24-9.5Kb RNAladder（左）轉移到Nytran膜上面后用本產品染色的效果圖。