一步式PAGE染液說明書

產品編號：BTN61204

規格：10T

產品及特點：

本產品原名叫一步式PAGE 染色，是目前zui簡單、zui靈敏的基于考馬斯亮藍的PAGE 膠蛋白質染色產品，完全可以取代zui常用的Coomassie Brilliant Blue G-250 PAGE 染色。它具有下列特點:

1. 一步式操作。將漂洗后的PAGE 膠放入染色液中后即可不管，無固定和脫色步驟，zui快10 分鐘即可見條帶（對ng 級別的樣品需要過夜）。

2. 高靈敏度。靈敏度跟銀染，SYPRO Ruby 和Deep Purple 等相當，達到納克水平。

3. 肉眼即可觀察結果，而SYPRO Ruby 和Deep Purple 等納克級染料需要貴重的檢測儀器。

4. 與質譜等后續分析方法兼容。

5. 健康環保。不使用乙酸和甲醇等有刺激性和毒性的試劑。

6. 可以用于任何PAGE 膠的蛋白檢測，包括SDS-PAGE 和2D膠。

7. 即開即用，足夠至少10次minigel 染色。

規格及成分：

保存條件：

常溫運輸和保存、有效期半年。

自備試劑：

Milli-Q水

使用方法：

一: 洗滌(此步十分重要，否則PAGE 膠中殘留的SDS 等物質會嚴重干擾后續染色)

如果蛋白質不用于后續的質譜分析，可以采用下面的快速漂洗法

1. 電泳結束后，小心將PAGE 膠轉移到裝有100 mL Milli-Q 水的容器中。

2. 微波30 秒鐘左右（到還沒沸騰為止）。

3. 在臺式脫色搖床上室溫搖晃3-5分鐘后倒掉Milli-Q 水。

4. 再重復第1-3 步兩次后直接進入第8 步操作。

如果蛋白質要用于后續的質譜分析，可以采用下面的溫和漂洗法

5. 電泳結束后，小心將膠轉移到裝有100 mL Milli-Q 水的容器中。

6. 在臺式脫色搖床上室溫搖晃10 分鐘后倒掉Milli-Q 水(不能縮短時間)。

7. 再重復上面的漂洗步驟兩次后進入第8 步操作。

二：染色

8. 加入足夠的本產品到裝有PAGE 膠的容器中，加入得量以覆蓋PAGE 膠為zui低要求，一塊minigel 一般需要10-20 mL 本產品。注意：本產品用前需要充分搖晃半分鐘，其正常顏色為深藍綠色，含顆粒狀物。

9. 在臺式脫色搖床上室溫搖晃染色直到PAGE 膠上出現滿意條帶為止。對ug 級的蛋白樣品(注:此處指每條帶的量，不是總蛋白量。下同)，一般10分鐘即可見到條帶，2 小時染色即可完成；但對ng 級的蛋白樣品，一般需要進行過夜染色。

10. 本方法染色背景很低，可以不需要脫色，直接用Milli-Q 水漂洗PAGE膠2 次，每次3 分鐘。洗滌可以使背景變得更干凈，也可以洗去PAGE膠表面的顆粒狀物。但如果需要背景更干凈，用戶也可以用自備的脫色液脫色10-60 分鐘。配制20 mL 脫色液的方法是：將2 mL 無水乙醇，0.5 mL 磷酸（濃度為85%左右）和17.5 mL Milli-Q 水混勻后即可。

11. 拍照保留染色結果，其余后續處理按相關操作進行。

12. 一般不建議重復使用用過的本產品。但如果短期內重復使用2-3次，靈敏度也比常規的考染高，只是染色到滿意條帶出現需要更長的時間。