耐熱型SYBR染料,電泳級說明書

產品編號：BTN61201

規格：50μL

產品及特點：

本產品是改良型的SYBR Green I，它跟常規的SYBR Green I 相比檢測靈敏度相當，但具有耐熱、耐水解的特點，所以十分穩定，使用更加方便。

1. 穩定，本產品濃縮液可以在常溫下存放一年以上，方便運輸和保存。本產品的1X 工作液在常溫下的半衰期為120 多天，比常規的SYBR Green I（5天）長20 倍以上。

2. 使用方便多樣，既可以在制備凝膠時加入到融化的瓊脂糖凝膠中，還可以象常規的SYBR Green I、SYBR Gold、SYBR safe、GelStar 一樣用于電泳后染色。

3. 靈敏，其檢測靈敏度跟SYBR Green I 相同，比EB 靈敏200-100 倍。

4. 低毒、環保、健康。

5. 可檢測各種核酸分子，包括dsDNA、ssDNA、RNA 和Oligo。

6. 兼容性好，不但與常用的TAE、TBE 和5分鐘超快電泳緩沖液SuperBuffer-2等兼容，還與常用的UV 檢測系統和可見光激發檢測系統兼容。

7. 對 DNA 泳動速度的影響小于常規的SYBR Green I。

8. 半衰期長，自然損耗低，可多次使用，使其相對使用成本比常規的SYBR Green I和其它非對稱花青類染料低。

規格及成分：

保存條件：

常溫運輸保存（避光），保存期為一年。

自備試劑：

電泳試劑。

使用方法：

本產品可以在電泳中染色，優點是用量少，但如果與DNA 的比例沒達到zui佳時，帶型容易彌散；也可以在電泳后染色，優點是不會對DNA 電泳產生干擾，但用量大，還需要額外的染色過程。客戶可以根據需要選擇使用方法。百奧萊博不建議將本產品用于染色后再上樣（即先將其與DNA 混合然后再上樣），也不建議將其用于PAGE(因分子較大,難以進入凝膠)。

使用方法之一：電泳中染色(僅適于瓊脂糖凝膠電泳)

1. 按常規方法制備瓊脂糖凝膠，膠中不能含任何其他染料。

2. 將按1：10000 的比例將SuperSYBR 直接加到熔化的瓊脂糖凝膠中并充分搖晃均勻（5 μL 可以加入到50 mL 熔化的瓊脂糖凝膠中），然后倒膠。

3. 其余的上樣、電泳、UV 觀察等步驟按常規操作進行。在254 nm 紫外照射透視下，與雙鏈DNA 接合的SuperSYBR 呈現綠色熒光。拍照時zui好使用綠色濾光片。如果使用300 nm 紫外照射透視儀觀察也可以，但效果不如254 nm。

4. 未用完的膠可以反復融化，如果保存時間在一周以上，zui好閉光。

注意：本方法的靈敏度比在熔化的瓊脂糖凝膠中加EB 染色的方法高，比電泳后染色經濟（后者用量大）。SuperSYBR 與DNA 結合同SYBR Green I 跟DNA 的結合一樣，有時會影響DNA 樣品的相對遷移率。如果出現DNA 電泳帶彌散的現象，說明SuperSYBR 和DNA 的比例沒達到zui佳，可以適當調節DNA 的上樣量。

使用方法之二：電泳后染色

1. 按照常規方法進行電泳。

2. 用水將10000×SuperSYBR 原液稀釋2500 倍成4×工作液（如：將5 μL SuperSYBR 原液加到10 mL 水和2.5 mL 5 M NaCl 中，加NaCl 的目的是促進SuperSYBR 與DNA 的結合）。由于SuperSYBR 對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親和力，故建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。

3. 將電泳后染色工作液倒入合適的聚丙烯容器中，放入凝膠，用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30 分鐘，染色時間因凝膠濃度和厚度而定。

4. 在 254 nm紫外照射透視下，與雙鏈DNA 接合的SuperSYBR 呈現綠色熒光。拍照時zui好使用綠色濾光片。如果使用300 nm 紫外照射透視儀觀察也可以，但效果不如254 nm。

注意：電泳后染色工作液可以冷凍避光儲存，可以在一個星期內重復使用多次。