一步式細(xì)菌DNA提取試劑盒說明書

產(chǎn)品編號(hào)：BTN60806

規(guī)格：50T

產(chǎn)品及特點(diǎn)：

本產(chǎn)品是在一步裂解式超快細(xì)菌基因組DNA提取試劑，其zui大特點(diǎn)是快速，可以用于大多數(shù)革氏陽性和陰性細(xì)菌基因組DNA的快速提取。

1. 操作簡(jiǎn)單，整個(gè)過程不到10分鐘（對(duì)一個(gè)樣品而言）。

2. 產(chǎn)率一般在3-10 μg/mL過液培養(yǎng)細(xì)菌。

3. OD260/280一般在1.8以上。

4. DNA片段長(zhǎng)度一般在40-50 Kb左右。

5. 適用范圍廣，可以使用于大多數(shù)細(xì)菌。

6. 也可以使用過夜培養(yǎng)細(xì)菌和菌落。

7. 得到的DNA可以直接用于PCR，酶切或其他分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

規(guī)格及成分：

保存條件：

常溫運(yùn)輸及保存（溶菌酶需要冰袋運(yùn)輸，-20℃保存），有效期一年。

自備試劑：

超純水。

使用方法：

一: 對(duì)革氏陰性細(xì)菌

1. 如果一步式裂解液產(chǎn)生沉淀，需要65℃預(yù)熱直到沉淀溶解，搖勻待用。

2. 將0.1-1.5 mL過夜培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到1.5 mL塑料離心中，室溫12,000 rpm離心1分鐘沉淀細(xì)菌，棄上清。

3. 加入0.5 mL 一步式細(xì)菌裂解液到離心管中，吹打混勻。

4. 加入0.5 mL專用上柱液到裂解液中，顛倒混勻后全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫放置至少2分鐘。

5. 12,000 rpm室溫離心1分鐘，DNA將吸附在離心吸附柱的膜上，倒棄收集管中的穿透液。

6. 將0.5 mL通用洗柱液加入離心柱中，12,000 rpm室溫離心1分鐘，棄穿透液。

7. 重復(fù)第6步操作一次。

8. 空甩半分鐘，將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到新的離心管中。

9. 加50-100 uL DNA洗脫液，室溫放置3-5分鐘。

10. 12,000 rpm室溫離心1分鐘即得DNA溶液。

二: 對(duì)革氏陽性細(xì)菌

1. 將0.1-1.5 mL過夜培養(yǎng)的細(xì)菌離心1分鐘后，重懸于0.6 mL溶菌液中（60 mL自備超純水+600 mg溶菌酶)，顛倒混勻5-10次后37℃保溫30分鐘(有的菌種可能需更長(zhǎng)時(shí)間，需要自己根據(jù)細(xì)菌不同而決定)。

2. 12,000 rpm離心10分鐘，小心棄上清。

3. 后續(xù)處理接革氏陽性細(xì)菌處理的第3步。