中草藥DNA提取試劑盒說明書

產品編號：BTN60805

規格：20T

產品及特點：

基于PCR 的中藥分子鑒定方法是辨別中藥真偽，保證藥材質量，促進中藥產業現代化的十分重要的手段。但由于日曬，高溫烘烤等處理大地破壞了中藥材DNA的完整性；處理過程中多酚多糖及其氧化物也會與DNA發生復雜的化學反應，所以從中藥材中提取可以用于PCR 的DNA 比從新鮮植物中提取要困難很多。為解決這一問題，我們公司在植物DNA提取試劑盒產品基礎上開發了本產品。其特點如下：

1、適合于大多數藥材。

2、得到的DNA 純凈，OD260/280 一般都在1.6 以上，原液或100 倍之內的稀釋液一般都能直接作為PCR 模板。

3、操作簡單，整個過程只需要三十分鐘左右。

4、試劑無害，環保衛生。

規格及成分：

保存條件：

常溫運輸及保存，有效期一年。

自備試劑：

氯fang、異丙醇、75%乙醇。

使用方法：

1、65℃預熱溶液A，待其沉淀溶化后，充分混勻，取0.75 mL 加入到10-15mL的塑料離心管中并放置于65℃待用。

2、稱取20 mg 左右的中草藥，先剪成或研磨成微小的碎片，然后轉移到預熱的溶液A 中勻漿，勻漿過程中將產生大量泡沫，屬于正常現象。也可以液氮研磨后將中草藥粉末加入到預熱的溶液A 中(建議不要在陶器或玻璃研缽中研磨，因為其主要成分二氧化硅會非特異地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研缽中研磨)。

3、將勻漿液置于65℃水浴保溫5 分鐘，然后全部轉移到新的1.5mL 塑料離心管中(此時勻漿液較為粘稠，可將槍頭剪去一截后轉移上清，植物碎片可倒入)。

4、12000-15000 g 室溫離心3 分鐘，將上清轉移到新的1.5mL 塑料離心管中(上清液的體積一般為200-700 μL，如果體積超過700 μL，多余部分可以不要)。有的上清液中會有少量細小塊狀物，但對后續操作沒有影響，不必進行特殊處理。

5、在上清液中加入等體積的溶液B，上下顛倒30 秒充分混勻（溶液將呈白色混濁狀），然后置冰浴中5 分鐘。

6、12000-15000 g 室溫離心3 分鐘，轉移上清到新離心管中。

7、加入0.2 mL 的氯fang(自備)，震蕩器上充分振蕩30 秒混勻。

8、12000-15000 g 室溫離心3 分鐘，兩相交界面將有白色膜狀物。小心轉移上清到新離心管中。

9、重復氯fang抽提步驟一次，此步可以有效去除含色素物質。

10、加入0.6-1 倍體積的異丙醇(自備)，上下顛倒30 秒混勻。

11、12000-15000 g 離心5 分鐘，棄上清，管底將有微小DNA 沉淀。

12、沉淀用75%乙醇清洗2 次后，室溫晾干。

13、加入50-100 μL 自備緩沖液(如TE)溶解沉淀。DNA 即可用于電泳，酶切和PCR 等反應。如果需要測OD，則必須乙醇沉淀去除降解的RNA。

注意:用本產品提供的RNase處理DNA樣品時,做好按《分子克隆手冊》等參考書上的方法徹底去除其中的DNase。