Taq DNA聚合酶說明書

產品編號：BTN51206

規格：5000U

產品及特點：

本產品是Thermus aquaticus（水生棲熱菌）的DNA聚合酶基因在E. coli中表達而得,具有以雙鏈DNA為模板的5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性。Taq DNA聚合酶長為832個氨基酸，分子量為 94 Kd。該酶可以廣泛用于PCR，RT-PCR，加尾反應等。

1.耐熱DNA聚合活性，該酶在90℃以上幾乎無DNA合成，在75～80℃時延伸率約150個核苷酸，70℃時為60個核苷酸/秒，55℃時為24個核苷酸/秒。在65～68℃并有Mn²⁺存在時還具有逆轉錄活性。

2.熱穩定，在PCR混合物中95℃保溫40 分鐘仍可保持50%的活性。

3.Mg²⁺離子依賴性，MgCl₂濃度在2.0 mM時該酶催化活性zui高。

4.本酶無3'→5'外切活性，不具3'→5'校對功能，堿基錯配機率為2.1×10^-4。

規格及成分：

保存條件：

低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

以λ DNA為模板進行PCR擴增反應為例

1.按下列組份配制PCR反應液。

注：10×PCR Buffer 含15 mM MgCl2(在PCR體系中的終濃度為1.5 mM），是否需要補加MgCl₂根據實驗決定。但一般不需要補加。

推薦50μL PCR反應體系中模板DNA推薦使用量

2.PCR反應條件

以λDNA為模板，擴增1 kbp的DNA片段的PCR反應條件如下：

注：PCR反應條件視模板、引物等的結構條件不同而各異。在實際操作中需根據模板、目的片段的大小、堿基序列和引物的長短等具體情況，設定zui佳的反應條件（溫度、時間等）。

注意事項：

PCR的反應液請在冰中配制，然后置于PCR反應儀上進行PCR反應。這種冷啟動法（Cool Start Method）可增強PCR擴增的特異性，減少PCR過程中的非特異性反應，能得到良好的PCR結果。