非酶RNA清除劑1.0說明書

產(chǎn)品編號：BTN51203

規(guī)格：1.5ml

產(chǎn)品及特點：

本產(chǎn)品為非酶法質(zhì)粒RNA和蛋白質(zhì)污染的去除試劑，專用于從堿變性法純化的質(zhì)粒中去除其中的大部分RNA污染和大部分蛋白質(zhì)污染。

1. ，能去除質(zhì)粒粗提物中80%左右的RNA污染和60%的蛋白污染。而常用的RNase或LiCl處理只能去除RNA，不能去除蛋白質(zhì)污染。

2. 快速，整個過程只需要十余分鐘，不需要37℃保溫。

3. 經(jīng)過本產(chǎn)品處理過的樣品，由于沒有RNA和蛋白質(zhì)的干擾，使用硅膠膜或其他吸附離心法吸附、回收質(zhì)粒DNA的效率比沒處理過的樣品更高。

4. 價格不到RNase A的1/2，在質(zhì)粒的大規(guī)模制備時成本更加明顯。

5. 制備臨床用(如基因治療)的質(zhì)粒DNA 時，可以減少后期在臨床報批、生產(chǎn)、質(zhì)檢和使用中的很多麻煩（使用生物來源的RNase A 和蛋白酶時，容易帶入對人體有害的內(nèi)毒素、LPS等污染物）。

規(guī)格及成分：

保存條件：

常溫運輸和保存，有效期一年。

自備試劑：

75%乙醇。

使用方法：

A）從堿變性澄清液中去除RNA和蛋白質(zhì)

1. 將約1/5體積的RNA Erasol加入到堿變性澄清液中（加溶液III后離心得到的上清液一般是450 μL, 所以需要加入50 μL）。

2. 混勻后室溫放置10分鐘。

3. 室溫8000g 離心10分鐘。

4. 轉(zhuǎn)移上清到一新的離心管中，后續(xù)處理跟經(jīng)典的方法一樣(即加入等體積的異丙醇或兩倍體積的乙醇,混勻后室溫離心10 分鐘,棄上清液后用1 mL 75%乙醇洗一次,短暫離心，去掉殘留液體,加入適量TE緩沖液溶解質(zhì)粒待用)。

B） 從質(zhì)粒粗提液中去除RNA和蛋白質(zhì)

1、將1/4體積的RNA Erasol-1直接加入到已經(jīng)溶解在TE或其他溶解液的質(zhì)粒DNA中。

2、混勻后室溫放置10分鐘。

3、室溫8000g離心10分鐘。

4、轉(zhuǎn)移上清到一新的離心管中，加入等體積的異丙醇或兩倍體積的乙醇。

5、混勻后室溫離心10分鐘。

6、棄上清液后用1 mL 75%乙醇洗一次。

7、短暫離心，去掉殘留液體。

8、加入適量TE 緩沖液溶解質(zhì)粒待用。

使用效果：

 

圖注：用經(jīng)典的堿變性法從1.5mL E.coli過夜培養(yǎng)液中提取的pGEM-3質(zhì)粒粗提物（加溶液ⅡI離心上清）經(jīng)過RNA Erasol處理后(LA+RNA Erasol)與未經(jīng)處理的樣品(AL)電泳比較。上

樣量為1/5。

 

圖注：用經(jīng)典的堿變性法提取的pGEM-3質(zhì)粒DNA溶于TE中后，經(jīng)過RNA Erasol處理的（+）與未經(jīng)處理的（-）樣品進行電泳比較。處理過的樣品失去80%左右的RNA。

 

 

 

疑難解答：

Q： 電泳檢測質(zhì)粒DNA時也需要將其RNA污染去掉嗎?

A： 是。否則RNA 將結(jié)合大部分的EB 溶液,使質(zhì)粒DNA 的帶型減弱。

Q： RNA Erasol-1 跟RNA Erasol-2 有何區(qū)別？

A： 1。RNA Erasol-2 處理過的樣品不再需要醇/鹽沉淀處理，而RNAErasol-1 處理的樣品還需要醇/鹽沉淀去除RNA Erasol-1；2. RNAErasol-2 與柱式硅膠膜純化方法兼容，而RNA Erasol-1 不兼容；3是RNA Erasol-2 不但可以用于去除質(zhì)粒DNA的RNA污染，還可以用于去除基因DNA的RNA污染，而RNA Erasol-1只能用于質(zhì)粒DNA樣品。