一管式病毒DNA提取試劑盒說明書

產品編號：BTN3674

規格：50T/200T

產品及特點：

本產品是專門用于從血清(血漿)等液體樣品中提取病毒(如HBV)DNA的產品，其原理是異硫氰酸胍/LiCl 溶液即能裂解病毒，又能沉淀DNA。本產品靈敏度高，穩定性好，使用簡單快捷，尤其適合于整合到臨床PCR 檢測試劑盒中。

1. 回收率高，可以達到90%以上，高于大部分基于離心柱的提取方法。

2. 靈敏度高，通過PCR 檢測到的zui終靈敏度可以達到30-50 拷貝/mL。

3. 一管式操作，不使用離心柱，整個操作過程均在室溫下完成。

4. 安全，不需要使用苯酚和氯fang等有機溶液。

5. 處理量大，如果加上病毒離心富集步驟，zui多可以處理1.5 mL 液體病毒樣品。

6. 與PCR 和熒光PCR 兼容。

規格及成分：

保存條件：

常溫運輸及保存，有效期一年。

自備試劑：

異丙醇，70%乙醇。

使用方法：

1. 在1.5 mL 螺旋蓋塑料離心管(zui好不要使用壓蓋式塑料離心管)中加入0.1-0.2 mL 液體樣品。如果病毒需要富集，可以將1.5 mL 液體在4℃ 24,000g 冷凍離心60 分鐘, 移棄1.3 mL 后繼續操作。

2. 加入0.6 mL 病毒DNAOUT 溶液，振蕩30 秒混勻后室溫放置10 分鐘。

3. 振蕩30 秒混勻后加入0.7 mL 異丙醇，振蕩30 秒混勻后，15,000 g 室溫離心15 分鐘。

4. 移棄上清，注意不要觸及管底的DNA 沉淀，加入1.0 mL 70% 乙醇，振蕩數秒后 15,000 g 室溫離心5 分鐘。

5. 移棄上清，注意不要觸及管底的DNA 沉淀。再短暫離心數秒, 移棄殘留上清（殘留的乙醇會影響后續反應）。此時離心面的管壁上將有可見的膜狀沉淀,加入200 μl 超純水，用移液槍仔細吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀，使其溶解。溶解液混濁或有少量不溶物是正?，F象，如果溶于200 uL 水而樣品使用量不超過PCR 體系的1/2 時，不溶物一般不會影響后續PCR 反應。不要離心只取上清使用，因為不溶沉淀物中含有DNA，必須取混合液使用（哪怕很渾濁）。

6. 樣品可以直接取適量用于PCR，也可保存于-20℃長期保存。

使用效果：

圖注：用本產品和市場上某同類產品分別提取0.2 mL HBV 陽性血漿(含1000 拷貝/mL HBV)，DNA 溶于200μl 水中，取5 μl進行熒光PCR( 使用MJResearch 的CHROMO4 熒光PCR 儀)。紅和綠線表示本產品，藍線表示市場上某同類產品。