技術背景

銅為人體營養中的必需的微量元素。作為輔因子，含銅酶蛋白在鐵和兒茶酚胺（catecholamine）代謝、游
離自由基清除、血紅蛋白、彈力纖維和膠原蛋白合成等活動中起著重要作用，從而調節體內氧化還原狀態
銅在肝臟和血漿中以銅藍蛋白（caeruloplasmin）形式存在，具有鐵氧化酶抗氧化活性。銅含量過低，會導
致智力遲鈍、色素脫失、貧血、張力減退、骨壞血病變化。一旦缺失，將導致心臟病變、骨質疏松、骨關
節炎、Menkes綜合征、威爾森氏癥等。由此，銅含量檢測成為威爾森氏癥、小細胞低色素性（microcytic
hypochromic anemia）貧血、骨病等的診斷指標。銅的檢測包括化學法、火焰光度法（flame photometry）、原子吸收分光光度法等技術，但容易受到其它金屬元素的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求。4-(3,5-溴基-2-吡啶偶氮基)-5-(N-乙基-N-磺丙基)苯胺（4-(3,5-Bromo-2-pyridylazo) -5-(N-ethyl-N-sulfopropyl)aniline；Di-Br-PAESA）比色法是一種穩定、簡便、準確的銅檢測技術。在弱酸性條件下，銅從復合物中解離出來；抗壞血酸（還原型）將解離出來的二價銅離子還原成一價銅離子，一價銅離子與顯色劑DiBr-PAESA生成藍色絡合物，在分光光度儀下通過吸光峰值的變化（波長580nm），來定量測定細胞銅的總濃度。