技術背景

蛋白磷酸化酶2A（protein phosphatase 2A；PP2A；EC 3.1.3.16），又稱為2型蛋白絲/蘇氨酸磷酸化酶，催化亞體，α異構體（type II protein serine/threonine phosphatase catalytic subunit，alpha isoform），是主要的絲/蘇氨酸磷酸化酶成員之一，從酵母到人類高度進化保留。其功能與細胞周期進程、DNA復制和轉錄、RNA剪切、轉譯等有關。PP2A的結構為異源三體，包括結構亞體、調節/目標亞體和催化亞體。PP2A的目標蛋白是腫瘤信號通路的蛋白分子，例如Raf，MEK，Akt等。基于特異性底物磷酸化多肽RKpTIRR，在抑制劑黑海綿酸（okadaic acid）存在與否的情況下，受到蛋白磷酸化酶2A的去磷酸化作用，釋放出游離磷酸根，由硫酸亞鐵氨還原產生鉬藍顯色反應后，在分光光度儀下（660nm波長）產生峰值的變化，由此測定黑海綿酸敏感性蛋白磷酸化酶2A（PP2A）的特異活性。