蘇木素-伊紅（H-E）染液說明書
Cat number：KFS119
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For Research Use o
一．試劑盒說明
蘇木素—伊紅染液（HE）染液主要用于顯示各種組織正常成分及病變的一般形態結構，是生物學、組織學、病理學及細胞學等學科必不可少的基本的常規染色方法。在病理診斷、教學與科研中廣泛應用，具有重要價值。
細胞中的細胞核是由酸性物質組成，它與堿性染料（蘇木素）的親和力較強，而細胞漿則相反，它含有堿性物質與酸性染料（伊紅）的親和力較大。因此，組織切片經 HE 染色后，細胞核被蘇木素染成藍色，細胞漿，肌纖維、膠元纖維等染成不同程度的紅色，紅細胞則呈橙紅色。
二．試劑盒組份
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試劑編號 |
試劑組成 |
小包裝 |
中包裝 |
大包裝 |
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試劑一 |
核染液 |
25ml×1 瓶 |
50ml×1 瓶 |
250ml×1 瓶 |
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試劑二 |
漿染液 |
25ml×1 瓶 |
50ml×1 瓶 |
250ml×1 瓶 |
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試劑三 |
增色液 |
25ml×2 瓶 |
50ml×2 瓶 |
250ml×2 瓶 |
分色液（需要者送，一、二、三種染色方法均不需要，只有第四種染色方法要用）儲存條件及有效期：本試劑盒應置室溫密閉保存，有效期一年。
所需儀器：光學顯微鏡、染缸、玻片、滴管、秒表、記號筆等。
三．操作方法
1. 一種染色法
① 染色之前用蒸餾水潤濕已脫蠟并已梯度入水的組織 1-2 分鐘，甩掉水分，但要確保蒸餾水潤濕整個組織，并均勻分布；
② 試劑一核染液染色 5 分鐘左右，水洗 3-5 秒；
③ 試劑二漿染液染色 10-30 秒，用試劑三增色液沖洗 1-2 次，濾紙吸干或自然晾干；此法可立即封片鏡檢
2.第二種染色法
① 染色之前用蒸餾水潤濕已脫蠟并已梯度入水的組織 1-2 分鐘，甩掉水分，但要確保蒸餾水潤濕整個組織，并均勻分布。
② 試劑一核染液染色 5 分鐘左右，水洗 3-5 秒
③ 試劑二漿染液染色 10-30 秒，在水中蘸 1-2 次，濾紙吸干或自然晾干；此法在玻片干后需無水乙醇脫水 2 次后再封片鏡檢。
3.第三種染色法
① 染色之前用蒸餾水潤濕已脫蠟并已梯度入水的組織 1-2 分鐘，甩掉水分，但要確保蒸餾水潤濕整個組織，并均勻分布。
② 試劑一核染液染色 5 分鐘左右，水洗 3-5 秒
③ 試劑二漿染液染色 2 分鐘，在水洗 1-2 分鐘，濾紙吸干或自然晾干；此法在玻片干后需無水乙醇脫水 2 次后再封片鏡檢。
4.第四種染色法
① 染色之前用蒸餾水潤濕已脫蠟并已梯度入水的組織 1-2 分鐘，甩掉水分，但要確保蒸餾水潤濕整個組織，并均勻分布。
② 試劑一核染液染色 5 分鐘左右，水洗 3-5 秒，分色劑中蘸 2 下，水沖；
③ 試劑二漿染液染色 2 分鐘，直接梯度脫水（30%、70%、95%、無水乙醇、無水乙醇），濾紙吸干或自然晾干；此法可立即封片鏡檢
四種染色方法中只需取一種即可，建議用一種，操作快效果好。
染色結果：胞核呈紫藍色，胞漿呈紅色，紅細胞呈桔紅色，其它成分呈深淺不同紅色。
四．注意事項
⒈ 若染色較淺，可重復染色一次；
⒉ 冰凍切片用防脫載玻片，切好的片子如不及時染色可放-20℃保存，染色前不要用乙醇等固定，否則易造成掉片。
⒊ 如果伊紅染色太深，可延長水沖時間或者是再重復梯度脫水一次。
五．產品優點
1. 本染液，環保，對人體無傷害，染液內不含汞，甲醇等有毒試劑，可保護操作人員的健康。
2. 操作簡便，核染色與漿染液二步染色，染色清晰。
3. 快速從染色至封片，觀察多 8-10 分鐘。
4. 試劑保存時間長，不易產生沉淀和金屬氧化膜。
5. 封片后玻片長期保存。
附：樣本前處理
石蠟切片：
1. 脫蠟：用環保脫蠟劑或二甲苯脫蠟，每次 10-15 分鐘，共二次。
2. 梯度入水：樣本玻片侵入 95%、70%、30%乙醇各 2 分鐘，溫水 2 分鐘，如果脫蠟不干凈。需再次溫水 2 分鐘。此時玻片上除樣本部分略有水分外，撥片的其余部分均應無水珠。
冰凍切片：
1. 回溫：將預先制作好并保存在-20℃冰箱中的冰凍切片取出回溫，取以下方法中一種：
① 室內自然回溫；
② 可放到 37℃孵育箱中進行回溫；
③ 在 37℃水浴箱中放置一個小盒子，再將從冰箱中取出的切片架放到小盒當中，目的是讓冰凍切片回溫到 37℃。
2. 水合：將回溫好的切片，水中浸泡 30-60 秒左右。
血涂片及骨髓涂片：
1. 推片：去全血 3 微升左右置載玻片上，將推玻片與載玻片 30 度角，置于血滴正前方，稍往后移與血滴接觸，血滴沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面平穩向前滑動，至血滴鋪完血膜為止。
2. 涂片空氣中自然干燥，95%乙醇固定 2-3 分鐘，水洗約 30-60秒。
