Cat number：KFS007
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For Research Use Only
一、 試劑盒說明
漂片抗原修復液(Antigen Retrieval Solution for Floating Sections)是一種特別適合用于漂片的抗原修復液，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復。
細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導致蛋白之間的交聯(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點，導致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現一些假陽性染色結果。
本抗原修復液含有了廣泛使用的檸檬酸鈉等抗原修復試劑等，pH 值約為 8.5，可以有效降低漂片破碎的風險并去除醛類固定試劑導致的蛋白之間的交聯，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。
通常石蠟切片都需進行抗原修復處理，而冰凍切片可以不進行抗原修復處理。抗原修復會大大改善石蠟切片的免疫染色效果，但對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯著改善。特別是當冰凍切片免疫染色效果欠佳時，可以考慮嘗試進行抗原修復。從原理上來看，無論冰凍切片還是細胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品，進行抗原修復都會有效去除蛋白之間的交聯，充分暴露抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。
本產品特別適合用于漂片的免疫染色，也可用于常規的石蠟切片和冰凍切片等其它樣品的檢測。
一個包裝的本產品可以配制成 1000 毫升抗原修復液(1X)。按照每個片子需要 10 毫升抗原修復液(1×)計算，一個包裝的本產品可以用于 100 個樣品。
二、試劑盒組份
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組分 |
KFS007 |
儲存條件 |
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漂片抗原修復液(10X) |
100ml |
4℃或-20℃ |
三、使用注意事項
1、 抗原修復過程可以使用染色缸和染色架或郵寄夾進行操作。塑料染色缸、染色架和郵寄夾可以很好地耐受沸水浴，而玻璃染色缸需避免驟冷驟熱導致的玻璃破碎。
2、本抗原修復液使用前必須用重蒸水或 MilliQ 水稀釋 10 倍，配制成抗原修復液(1X)。
3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
四、操作方法
1. 對于石蠟切片：
a. 脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟 5 分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟 3 次。無水乙醇 5 分鐘，兩次。90%乙醇 5 分鐘，兩次，70％乙醇 5 分鐘，一次。蒸餾水 5 分鐘，兩次。
b. 抗原修復：將切片浸泡在抗原修復液(1X)中，80℃加熱約 30 分鐘?？乖迯鸵?1X)使用前需預熱到 80℃，加熱可以使用普通的水浴鍋。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5分鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。
2. 對于冰凍切片： 用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 分鐘。將切片浸泡在抗原修復液(1X)中，
80℃加熱約 30分鐘?？乖迯鸵?1X)使用前需預熱到 80℃。加熱可以使用普通的水浴鍋。隨后大約在 20-30 分鐘內冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續的免疫染色步驟。
3. 對于其它樣品的抗原修復，可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。
