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一、試劑盒說明

本通用型強力抗原修復(fù)液的抗原修復(fù)效果總體上要優(yōu)于常用的檸檬酸鈉抗原修復(fù)液。細胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點，導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。

本抗原修復(fù)液采用了可以直接逆轉(zhuǎn)醛類固定試劑交聯(lián)作用的試劑，可以非常有效地去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

通常石蠟切片都需進行抗原修復(fù)處理，而冰凍切片可以不進行抗原修復(fù)處理。抗原修復(fù)會大大改善石蠟切片的免疫染色效果，但對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時，可以考慮嘗試進行抗原修復(fù)。從原理上來看，無論冰凍切片還是細胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品，進行抗原修復(fù)都會有效去除蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。本產(chǎn)品對石蠟切片、冰凍切片、細胞爬片或涂片等樣品均適用。

一個包裝的本產(chǎn)品可以配制成 1000 毫升抗原修復(fù)液(1X)。按照每個片子需要 10 毫升抗原修復(fù)液(1X)計算，一個包裝的本產(chǎn)品可以用于 100 個樣品。

二、試劑盒組份

三、使用注意事項

抗原修復(fù)過程可使用染色缸和染色架或郵寄夾進行操作。塑料染色缸、染色架和郵寄夾可以很好地耐受沸水浴，而玻璃染色缸需避免驟冷驟熱導(dǎo)致的玻璃破碎。

抗原修復(fù)液使用前必須用重蒸水或 MilliQ 水稀釋 10 倍，配制成抗原修復(fù)液(1X)。

通用型強力抗原修復(fù)液(10X)含有低濃度的有毒試劑，請注意小心防護。為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

四、操作方法

1. 對于石蠟切片：

a. 脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟 5 分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟 3 次。無水乙醇 5 分鐘，兩次。90%乙醇 5 分鐘，兩次，70％乙醇 5 分鐘，一次。蒸餾水 5 分鐘，兩次。

b. 抗原修復(fù)：將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中，95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內(nèi)，的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1X)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

c. 

2. 對于冰凍切片：

用免疫染色洗滌液洗滌切片 5 分鐘。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中，95-100℃加熱約 20 分鐘(加熱時間可以控制在 10-30 分鐘內(nèi)，加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1X)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在 20-30 分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次，每次 3-5 分鐘。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

3. 對于其它樣品抗原修復(fù)，可參考石蠟切片或冰凍切片步驟進行。