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小鼠兒茶酚胺(CA)ELISAkit說明,小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA檢測試劑盒,小鼠兒茶酚胺(CA)酶聯免疫試劑盒技術資料
名稱：小鼠兒茶酚胺（CA）ELISA試劑盒
檢測范圍： 96T
0.8μg/L-20μg/L
使用目的：
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中兒茶酚胺（CA）含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠兒茶酚胺（CA）水平。用純化的小鼠兒茶酚胺（CA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入兒茶酚胺（CA），再與HRP標記的兒茶酚胺（CA）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兒茶酚胺（CA）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠兒茶酚胺（CA）濃度。 小鼠兒茶酚胺酶（CA）聯免疫分析試劑盒
試劑盒組成
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1 |
30倍濃縮洗滌液 |
20ml×1瓶 |
7 |
終止液 |
6ml×1瓶 |
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2 |
酶標試劑 |
6ml×1瓶 |
8 |
標準品（40μg/L） |
0.5ml×1瓶 |
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3 |
酶標包被板 |
12孔×8條 |
9 |
標準品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
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4 |
樣品稀釋液 |
6ml×1瓶 |
10 |
說明書 |
1份 |
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5 |
顯色劑A液 |
6ml×1瓶 |
11 |
封板膜 |
2張 |
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6 |
顯色劑B液 |
6ml×1/瓶 |
12 |
密封袋 |
1個 |
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
小鼠兒茶酚胺（CA）ELISA試劑盒
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
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20μg/L |
5號標準品 |
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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10μg/L |
4號標準品 |
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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5μg/L |
3號標準品 |
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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2.5μg/L |
2號標準品 |
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
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1.25μg/L |
1號標準品 |
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
小鼠兒茶酚胺(CA)檢測試劑盒
