利用酸溶液提取得到(WSP)可溶性果膠,采用咔唑比色法測定果膠含量。果膠水解成半
乳糖醛酸,在硫酸溶液中與咔唑試劑進行縮合反應(yīng),生成物質(zhì)在530 nm 處有zui大吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、80%乙醇、丙酮、濃硫酸(不
允許快遞)、研缽和蒸餾水。
樣品的前處理:
1、 細胞壁的提取:取約0.3g 樣本,加入1mL 80%乙醇,室溫快速勻漿,95℃水浴20min,
冷卻至室溫,4000g 25℃離心10min,棄上清。沉淀加入1.5mL80%乙醇和丙酮各洗一
遍(渦旋振蕩2min 左右,4000g 25℃離心10min,棄上清即可),沉淀即為粗細胞壁,
加入1mL 試劑一(去除淀粉)浸泡15 小時,4000g 25℃離心10min,棄上清,將沉淀
干燥,稱重得細胞壁物質(zhì)(CWM)。
2、 WSP 的提取:稱取烘干的CWM 3mg,加入1mL 試劑二,充分勻漿。8000g 4℃離心10min,
取上清液待測。





