固定液、破膜劑用于細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色前對(duì)細(xì)胞膜的處理。固定液起穩(wěn)定細(xì)胞膜、保
持細(xì)胞膜表面抗體與抗原結(jié)合的作用;破膜劑使流動(dòng)的、完整的細(xì)胞膜產(chǎn)生小孔以利于抗體
進(jìn)入細(xì)胞。用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)抗原及DNA時(shí),對(duì)待測細(xì)胞進(jìn)行固定、破膜處理后,
加入相應(yīng)抗體或檢測試劑,孵育一定時(shí)間即可上機(jī)分析。
儲(chǔ)存條件:
4℃避光保存,勿冰凍。
使用方法:
1. 收獲待測細(xì)胞,1000 rpm離心10 分鐘,棄上清;
2. 加入500 ul 預(yù)冷的固定液;
3. 室溫孵育10 分鐘;
4. 1000 rpm離心10 分鐘;
5. 棄上清,加入PBS洗一次,1000 rpm離心10 分鐘;
6. 棄上清,加入1.5 ml破膜劑;
7. 室溫孵育10-15 分鐘;
8. 1000 rpm離心5 分鐘;
9. 棄上清,加入適量破膜劑重懸細(xì)胞;
10. 加入檢測抗體進(jìn)行染色后,用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。





