金屬離子固定化親和色譜于蛋白質(zhì)組學(xué)取得新進(jìn)展

中科院大連化物所生物技術(shù)部1809組封順、葉明亮、鄒漢法等人關(guān)于金屬離子固定化親和色譜固定相應(yīng)用于磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的研究成果(Immobilized Zirconium Ion Affinity Chromatography for Specific Enrichment of Phosphopeptides in Phosphro proteome Analysis)發(fā)表于9月份出版的《分子細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)》(Molecular & Cellular Proteomics,MCP,2007，6，1656-1665）。《分子細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)》由美國(guó)生物化學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)主辦，是蛋白質(zhì)組學(xué)研究領(lǐng)域zui高影響因子的學(xué)術(shù)刊物，2005年和2006年的SCI引用影響因子分別為9.876和9.62。

在復(fù)雜的蛋白質(zhì)提取物的酶解產(chǎn)物中，磷酸化多肽的高選擇性、高穩(wěn)定性富集是磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)分析的關(guān)鍵步驟之一。常規(guī)的金屬離子固定化親和色譜固定相以氨基二乙酸(IDA)或次氮基三乙酸(NTA)為螯合基團(tuán)與Fe3+，Ga3+等離子螯合，進(jìn)而選擇性地作用于磷酸化肽段，達(dá)到富集磷酸化多肽的目的。這一類吸附材料對(duì)含有酸性氨基酸殘基側(cè)鏈的肽段也具有富集作用，因此嚴(yán)重干擾磷酸化肽段的檢測(cè)。本項(xiàng)工作制備了磷酸脂改性的高分子材料微球，利用磷酸脂基團(tuán)與鎬離子的配位作用固定化鎬離子，再通過(guò)鎬離子與磷酸肽上的磷酸基團(tuán)的選擇性作用達(dá)到富集的目標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明鎬離子固定化親和色譜固定相對(duì)磷酸化肽段具有很高選擇性和富集效果。

金屬離子固定化親和色譜于蛋白質(zhì)組學(xué)取得新進(jìn)展