金屬離子固定化親和色譜于蛋白質(zhì)組學(xué)取得新進展

中科院大連化物所生物技術(shù)部1809組封順、葉明亮、鄒漢法等人關(guān)于金屬離子固定化親和色譜固定相應(yīng)用于磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的研究成果(Immobilized Zirconium Ion Affinity Chromatography for Specific Enrichment of Phosphopeptides in Phosphro proteome Analysis)發(fā)表于9月份出版的《分子細胞蛋白質(zhì)組學(xué)》(Molecular & Cellular Proteomics,MCP,2007，6，1656-1665）。《分子細胞蛋白質(zhì)組學(xué)》由美國生物化學(xué)和細胞生物學(xué)學(xué)會主辦，是蛋白質(zhì)組學(xué)研究領(lǐng)域zui高影響因子的學(xué)術(shù)刊物，2005年和2006年的SCI引用影響因子分別為9.876和9.62。

在復(fù)雜的蛋白質(zhì)提取物的酶解產(chǎn)物中，磷酸化多肽的高選擇性、高穩(wěn)定性富集是磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)分析的關(guān)鍵步驟之一。常規(guī)的金屬離子固定化親和色譜固定相以氨基二乙酸(IDA)或次氮基三乙酸(NTA)為螯合基團與Fe3+，Ga3+等離子螯合，進而選擇性地作用于磷酸化肽段，達到富集磷酸化多肽的目的。這一類吸附材料對含有酸性氨基酸殘基側(cè)鏈的肽段也具有富集作用，因此嚴重干擾磷酸化肽段的檢測。本項工作制備了磷酸脂改性的高分子材料微球，利用磷酸脂基團與鎬離子的配位作用固定化鎬離子，再通過鎬離子與磷酸肽上的磷酸基團的選擇性作用達到富集的目標。實驗結(jié)果表明鎬離子固定化親和色譜固定相對磷酸化肽段具有很高選擇性和富集效果。

金屬離子固定化親和色譜于蛋白質(zhì)組學(xué)取得新進展