293FT表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞,傳代細胞

293FT表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞形態特性:上皮樣 生長特性:半貼壁生長培養體系:DMEM+10%FBS 細胞狀態良好,訂購熱線!...
形態特性:上皮樣
生長特性:半貼壁生長
培養體系:DMEM+10%FBS
傳代方法:1:2
傳代情況:2-3天換頁
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
支原體檢測:陰性
備注:疏松貼壁,可直接吹打
我公司認為購買細胞的客戶有培養細胞的經驗,客戶收到細胞后,因運輸途中細胞會有分泌物,所以原瓶中的培養液不能循環利用,將其全部倒掉,使用自己實驗室的培養基(用推薦使用的培養基)
293FT表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞購買細胞注意事項:
客戶收到細胞后請務必仔細閱讀細胞注意事項,確保細胞的培養條件一致,如果由于培養條件不一致導致細胞出現問題,責任有客戶自行承擔。
1. 客戶在收到細胞時,請先觀察培養瓶是否完好,培養液是否外滲,培養液是否混濁。如發現有瓶破、滲漏、培養液混濁等問題,請在收到細胞后立即與我們聯系。
2. 由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請離心收集,重懸細胞,置培養箱培養,細胞會重新貼附于瓶壁。如果細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力。
3.收到細胞時如無異常情況,請按照細胞處理方法處理細胞。
293FT表達SV40T抗原人胚腎上皮細胞貼壁細胞處理方法:
一、 細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿完全培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。
二、 鏡下觀察:
未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養液移入無菌瓶中,留待日后培養用,原瓶(T25瓶)保留6-8ml完全培養液,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,按要求比例消化傳代。(收到細胞,建議棄去原基培養,使用新鮮完全培養基培養)
三、消化方法
1、將瓶裝的完全培養液移入無菌瓶中,留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。(收到細胞,建議棄去原基培養,使用新鮮完全培養基培養)
2、T25瓶加3ml PBS,洗一次,棄上清,再加1ml消化液消化,顯微鏡下觀察,等細胞完全脫離瓶壁分離成單個后,加培養基混勻,離心收集,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6, 1:6-1:8),每T25瓶加培養基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培養。
注意:因天氣原因,若客戶收到2ml小管細胞:收到細胞以后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作;然后將小管細胞轉移至T25培養瓶,加入5ml左右含FBS的培養基混勻,放入培養箱過夜培養后查看細胞匯合度:若未超過80%匯合度,換液繼續培養,根據情況傳代或者凍存。若超過80%匯合度,可直接進行傳代(細胞貼壁處理方法)。
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