基因在人胃癌組織和細(xì)胞株中的表達(dá)及其意義

　　目的：本實(shí)驗(yàn)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western Blot法以及免疫組化SP法分別檢測(cè)fascin1在胃癌細(xì)胞及胃癌組織中的表達(dá)，進(jìn)一步分析fascin1的表達(dá)水平和胃癌患者臨床病理參數(shù)的相關(guān)性。

　　方法：本實(shí)驗(yàn)由兩部分組成：

　　1.將正常胃粘膜上皮細(xì)胞株GES-1，不同分化胃癌細(xì)胞株MKN28、SGC-7901、MKN45分別種到25cm²培養(yǎng)瓶，待細(xì)胞長(zhǎng)到80%-90%融合時(shí)，選擇生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行RNA和蛋白質(zhì)的提取后。

　　2.采用免疫組化SP法檢測(cè)fascin1在80例胃癌組織標(biāo)本中的表達(dá)水平，同時(shí)取距離腫瘤組織>5cm的癌旁正常胃粘膜20例作為正常對(duì)照，并結(jié)合患者的臨床病理參數(shù)統(tǒng)計(jì)分析這些參數(shù)與 fascin1之間可能的關(guān)系。

　　結(jié)果：

　　1.實(shí)驗(yàn)中提取的細(xì)胞RNA和蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)質(zhì)量測(cè)定，均符合實(shí)驗(yàn)要求。

　　2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot分析法結(jié)果顯示：正常胃粘膜細(xì)胞及不同分化胃癌細(xì)胞株均有fascin1mRNA和fascin1蛋白的表達(dá)。

　　3.免疫組化顯示fascin1陽(yáng)性表達(dá)主要位于胃癌細(xì)胞的胞漿和胞膜，胃癌間質(zhì)中的血管內(nèi)皮細(xì)胞亦可見(jiàn)fascin-1陽(yáng)性染色。