elisa測定試劑盒檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

elisa測定試劑盒步驟：

1.加樣

 1. 除包被外都需45度加樣

 2.加樣體積要準確

 3.管底加樣，不能加在管壁上

 4.加樣時不能產生氣泡

2.溫浴  

 1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

 2.各ELISA板不應疊在一起。

 3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

 4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌  

 1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

 2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板  

 1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

 2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質