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使用液相色譜儀不可忽略的一些細節

發布時間:2019-04-15瀏覽次數:2855返回列表

    儀器的使用問題不容忽視,以下是使用液相色譜儀不可忽略的一些細節,大家務必多加留意!
    1、不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
    2、使用緩沖溶液時,做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
    3、氣泡會致使壓力不穩,重現性差,所以在使用過程中要盡量避免產生氣泡。
    4、如果進液管內不進液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
    5、要注意柱子的pH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
    6、換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插入新的流動相中。換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。
    7、長時間不用儀器,應該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應該用有機相(如,甲醇等),因為,純水易長霉。
    8、每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
    9、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或細的膜過濾)。 
    10、流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應該恢復到室溫后使用。
    11、C18柱不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。
    12、堵塞導致壓力太大,按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,清洗方法:
    (1)以異丙醇作溶劑沖洗;
    (2)放在異丙醇中間用超聲波清洗;
    (3)用10%稀硝酸清洗。