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小鼠骨特性堿性磷酸酶ELISA試劑盒操作流程

發布時間:2023-10-25瀏覽次數:894返回列表

  小鼠骨特性堿性磷酸酶ELISA試劑盒操作流程:

  (1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。

  (2)酶標板置4℃,包被過夜。

  (3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

  (5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。

  (6)洗板,同(4)。

  (7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

  (8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。

  (9)洗板,同(4)。

  (10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。

  (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。

  (12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

  小鼠骨特性堿性磷酸酶ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。古朵試劑盒