標簽：細胞裂解液 溶液 古朵生物 裂解緩沖液

  Triton-NH4OH細胞裂解液實驗說明書

  【信息說明】

  產(chǎn)品名稱：Triton-NH4OH細胞裂解液

  規(guī)格：100ml/500ml

  分類：細胞組分分離

  儲存條件：4℃,12個月

  用途：裂解緩沖液

  主要成分：無菌溶液。主要由0.5% Triton X-100、20mM NH4OH、PBS組成。

  Triton-NH4OH細胞裂解液【使用方法】

  A、組織細胞樣本的常規(guī)操作

  1、制備細胞懸液: 新鮮組織經(jīng)過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當方法制備成細胞懸液，離心棄上清。

  2、裂解：加入3～5倍細胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解。本操作步驟在4℃條件下操作佳，亦可在室溫下操作。

  3、離心： 4℃，離心5min，棄紅色上清。如無低溫離心機，本步驟亦可在室溫下操作。

  4、如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不完全，可以重復上述步驟2和步驟3各一次。

  5、洗滌：根據(jù)實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，離心2～3min，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

  6、如有必要，重復上述步驟5一次，共洗滌1～2次。

  7、根據(jù)實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀，進行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

  B、血液樣本的常規(guī)操作

  1、取新鮮抗凝血，離心5min，棄上清。

  2、 裂解：加入6～10倍細胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解。本操作步驟在4℃條件下操作佳，亦可在室溫下操作。

  3、離心：4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清。如無低溫離心機，本步驟亦可在室溫下操作。

  4、如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不完全，可以重復上述步驟2和步驟3一次。

  5、洗滌: 根據(jù)實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，離心2～3min，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

  6、根據(jù)實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀，進行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

  注意： 對于微量或少量的血液樣本，可以不用第1步操作，可直接加入10倍血液體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer進行第2步操作，并在4℃或室溫裂解4～15min。

  Triton-NH4OH細胞裂解液【簡介說明】

  在生物科研領(lǐng)域，經(jīng)常需要去除紅細胞，去除紅細胞的方法有多種，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Leagene Triton-NH4OH細胞裂解液(Triton-NH4OH Lysis Buffer)經(jīng)過優(yōu)化配方，在裂解無核紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(Lymphocyte)或其它有細胞核的細胞。

  本裂解液經(jīng)過濾除菌，經(jīng)過Triton-NH4OH Lysis Buffer處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續(xù)的細胞培養(yǎng)、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。

  【自備材料】

  1、胰蛋白酶

  2、離心機

  3、PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液

  4、胎牛血清

  Triton-NH4OH細胞裂解液實驗說明書 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務質(zhì)量”的方針。