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elisa試劑盒公司試劑的配方配比說明

發布時間:2017-05-24瀏覽次數:1635返回列表

導讀:上海樊克是elisa試劑盒公司,在elisa實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎,ELISA試劑以及各種溶液如何配置?
各種ELISA配置方法匯總如下:(1) ELISA實驗包被緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(3) ELISA實驗稀釋液;(4)ELISA實驗終止液(5)ELISA底物緩沖液(6)ELISA實驗TMB(四甲基聯苯胺)使用液(7)標準品稀釋液。
(1) ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaHCO3    1.59克
NaHCO3  2.93克
加蒸餾水至1000ml
(2) ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4         0.2克
Na2HPO4·12H2O  2.9克
NaCl          8.0克
KCl         0.2克
Tween-20 0.05%   0.5ml
加蒸餾水至1000ml
(3) ELISA實驗稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
(4) ELISA實驗終止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L)      24.3ml
加蒸餾水50ml。
(6) ELISA實驗TMB(四甲基聯苯胺)使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇)   0.5ml
底物緩沖液(PH5.5)      10ml
0.75%H2O2                           32μl
 標準品稀釋液:
PBS 1L配方pH7.2-7.4.濃度0.01mol/L:
磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,
磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
氯化鈉(NaCl):8g,
KCl 0.2g,
加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然后加入濃鹽酸或者氫氧化鈉調pH至7.2-7.4,后定容到1L.濃度為10mmol/L
(8)ELISA實驗封閉液:
牛血清白蛋白(BSA) 5克
加洗滌緩沖液至100ml。
值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。
為了保證ELISA實驗的準確性,實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔,嚴防交叉污染。