紅細胞裂解液是一種用于從人或鼠等的血液或組織細胞樣品中裂解并去除無細胞核紅細胞的溶液。本裂解液經過優化配方，在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(lymphocyte)或其它有細胞核的細胞。本裂解液的主要有效成分為氯化銨。...

使用方法：

組織細胞樣品：

1、新鮮組織經過膠原酶或胰酶等消化處理，通過適當方法分散成細胞懸液，離心棄上清。

2、加入3-5倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分鐘。例如細胞沉淀的體積為1mL，則加入3-5mL的紅細胞裂解液。本步驟在室溫或4 度操作均可。

3、400-500×g離心5分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

4、如果發現紅細胞裂解不完全，可以重復上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細胞不會影響后續的一些檢測。

5、洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，重懸沉淀，400-500×g離心 2-3分鐘，棄上清。可再重復1次，共洗滌1-2次。洗滌液用量通常應至少為細胞沉淀體積的5倍。4℃離心效果更佳。

6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數等后續實驗。

血液樣品：

1、取新鮮抗凝血，400-500×g離心5分鐘，離心棄上清。

2、加入6-10倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解1-2分鐘。例如細胞沉淀的體積為1mL，則加入6-10mL的紅細胞裂解液。本步驟在室溫或4 度操作均可。

【注】：

● 對于鼠的血液，裂解1-2分鐘已經足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至4-5分鐘，并且裂解過程中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。

3、400-500×g離心5分鐘，棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

4、如果發現紅細胞裂解不完全，可以重復上述步驟2和步驟3一次。通常極微量的紅細胞不會影響后續的一些檢測。

5、洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，重懸沉淀，400-500×g離心2-3分鐘，棄上清。可再重復1次，共洗滌1-2次。洗滌液用量通常應至少為細胞沉淀體積的5倍。4℃離心效果更佳。

6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數等后續實驗。

對于微量或少量的血液樣品，可以在第一步中不進行離心棄上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液，并在室溫或4℃裂解4-5分鐘。對于鼠的血液，裂解4-5分鐘已經足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至10分鐘，但通常不宜超過15分鐘，并且裂解過程中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。后續步驟相同。

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