本試劑盒按每個樣本處理1.5mL乳汁/唾液計，每個50T試劑盒大約可以用于提取75mL乳汁/唾液。如果需要處理大量的乳汁/唾液，將提取液按說明書標準操作的體積等比例調整即可。...

產品特點：

● 使用方便,無需超速離心,省時省力；

● 純度高,富集量大,應用范圍廣；

● 獲取的Exosome結構和功能完整；

● 穩定性好,便于運輸,便于保存。

試劑盒以外自備試劑和儀器：

● 離心機 ● 移液器 ● PBS或HBSS（無酚紅） ● 純水

使用注意事項：

● 以下以2mL乳汁/唾液為例，實際操作時按乳汁/唾液樣本和提取液用量體積比等比例調整使用即可。

● 不同乳汁/唾液樣本外泌體數量差異極大，請根據實際情況選擇乳汁/唾液樣本的量，根據下游應用和參考文獻確定。條件允許情況下采用盡可能多的乳汁/唾液樣本。

● 常規的乳汁/唾液樣本最佳培養上清上樣量為5-10mL及以上，條件允許的情況下采用盡可能多的乳汁/唾液樣本。

1. 收集2mL待提取的乳汁/唾液樣品，置2-8℃保存。

【注】：

● 凍存樣品解凍后置2-8℃保存。

2. 將樣品在4℃條件下，3000×g離心15分鐘。棄沉淀，收集上清。

3. 小心將上清移入另一干凈離心管中。

4. 將樣品在4℃條件下，10000×g離心20分鐘。棄沉淀，收集上清。

5. 小心將上清移入另一干凈離心管中。

6. 在2 mL乳汁/唾液樣品中加入2 mL提取液A，蓋緊離心管蓋，上下顛倒混勻1分鐘左右，使液體充分混勻。

7. 在4 mL液體樣品中加入1 mL提取液B，蓋緊離心管蓋，上下顛倒混勻1分鐘左右，使液體充分混勻。

【注】：

● 試劑B使用前請充分混勻。

8. 置2-8℃冰箱靜置過夜。

【注】：

● 靜置保存時間不少于10小時。

9. 在4℃條件下，10000×g離心60分鐘。

10. 小心移除上清，收集沉淀。

【注】：

● 盡可能吸干上清。

● 吸取時小心，防止吸掉沉淀。

11. 取500μL外泌體保存液將沉淀重懸，用移液器輕輕吹打混勻，得到外泌體沉淀重懸液，進行下列外泌體純化步驟操作。

清洗外泌體純化離心管：

1. 用緩沖液或純水進行預清洗。

2. 離心管中的過濾膜一旦潤濕后應避免變干。如果在預清洗后不是立即使用，則讓液體保留在濾膜上，直到使用。

【注】：

● 可以在外泌體提取步驟中需要使用前再清洗。

● 重復使用時要仔細檢查管壁上有沒有裂紋。

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