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特別提示：包括青蒿琥酯在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：青蒿琥酯
英文名稱：Artesunate
產品貨號：Y14319
產品規格：5g|25g|100g

CAS：88495-63-0
分子式：C₁₉H₂₈O₈
分子量：384.42
熔點：133℃
儲存條件：2～8℃
來源：青蒿
外觀：類白色粉末
溶解性：Soluble in DMSO (25mg/mL),and ethanol (25mg/mL).
用途：青蒿琥酯是一種半合成的青蒿素衍生物,用于治療瘧疾,它也被證明有效抗寄生蟲，如肝吸蟲（liver flukes），也顯示了對不同類
敏感性：對熱敏感

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名稱：硫酸鏈霉素溶液(100mg/ml)
貨號：RFT184
規格：5×1ml
鏈霉素是一種氨基糖苷類抗生素。它與慶大霉素的作用方式相似，抑制了蛋白質合成的起始、伸長和終止。

CAS號：3810-74-0
分子式：(C21H39N7O12)2·3H2SO4
分子量：1457.38

儲存條件：-20℃，有效期12個月

名稱：特美汀
貨號：QN0069
規格：3.2g
本品常用于抑制農桿菌生長，特別在胚性愈傷組織再生系統中，能達到很好的抑菌和再生效果。

CAS：4697-14-7
分子式：C15H14N2Na2O6S2
分子量：428.39
儲存條件：2～8℃
性狀：乳白色非結晶性粉末，有引濕性。
使用濃度：300 mg/L;400 mg/L;500 mg/L為了達到更加的使用效果，建議設置3~5個梯度

名稱：嘌呤霉素
貨號：QN0078
規格：25mg|100mg
本品是蛋白質合成抑制劑。抑制細菌、藻類原生物和哺乳動物細胞生長。

CAS：58-58-2
分子式：C22H29N7O5·2HCl
分子量：544.43
儲存條件：-20℃
純度：≥98%(TLC)
性狀：白色或白中帶有黃色的粉末
別名：二鹽酸嘌呤霉素;嘌呤霉素鹽酸鹽
溶解性：溶于水，參考濃度50mg/ml。

嘌呤霉素(Puromycin)是由白黑鏈霉菌(Streptomyces alboniger)發酵代謝產生的一種氨基糖苷類抗生素，通過抑制蛋白質合成而殺死革蘭氏陽性菌，各種動物和昆蟲細胞。某種特殊情況下有效作用大腸桿菌。作用機制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的類似物，能夠與核糖體的A位點結合并摻入到延伸的肽鏈中。嘌呤霉素同A位點結合后，不會參與隨后的任何反應，從而導致蛋白質合成的提前終止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素產生菌Streptomyces alboniger內發現的pac基因編碼嘌呤霉素N-乙酰轉移酶(PAC)，賦予機體對嘌呤霉素產生抗性。這一特性如今普遍應用于篩選特定攜帶pac基因質粒的哺乳動物穩定轉染細胞株。

嘌呤霉素在細胞穩轉株篩選中的普遍應用與慢病毒載體的特性有關，現在商業化的慢病毒載體多數都攜帶pac基因。在某些特定情況下，嘌呤霉素亦可以用來篩選轉化攜帶pac基因質粒的大腸桿菌菌株。

使用方法：

1.建議使用濃度
哺乳動物細胞：1-10 μg/mL，zuì佳濃度需要殺滅曲線來確定;
大腸桿菌：LB瓊脂培養基篩選穩定轉化pac基因的大腸桿菌，使用濃度為125μg/mL。注：使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩轉株需要的pH值調節，而且受宿主細胞本身的影響。

2.溶解方法
用蒸餾水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/ml的母液，經0.22 μm濾膜過濾除菌后分裝于-20℃凍存;也可溶于甲醇，配制成10 mg/ml的儲存液。

3. 嘌呤霉素殺滅曲線的確定(以shRNA轉染或者慢病毒轉導為例)
嘌呤霉素有效篩選濃度跟細胞類型、生長狀態、細胞密度、細胞代謝情況及細胞所處細胞周期位置等有關。為了篩選到穩定表達的shRNA細胞株，確定殺死未轉染/轉導細胞的zuì低濃度嘌呤霉素至關重要。建議初次做實驗的客戶一定要建立適合自身實驗體系的殺死曲線(kill curve)。
1)Day 1：24孔板內以5~8 x 104 cells/孔的密度鋪板，鋪足夠量的孔以進行后續的梯度實驗。37℃細胞孵育過夜;
2)Day 2：
a)準備篩選培養基：含不同濃度嘌呤霉素的新鮮培養基(如0-15μg/mL，至少5個梯度);
b)往孵育過夜后的細胞內更換新鮮配制的篩選培養基;之后37℃孵育細胞;
3)Day 4：更換新鮮的篩選培養基，并觀察細胞存活率。
4)根據細胞的生長狀態，約2-3天更換新鮮的篩選培養基;
5)每日監測細胞，觀察存活細胞率，從而確定抗生素篩選開始4-6天內有效殺死非轉染或者所有非轉導細胞的藥物zuì低濃度。

4. 哺乳動物穩定轉染細胞株的篩選
等轉染含有pac基因的質粒后，細胞在含有嘌呤霉素的培養基中增殖，以篩選出穩定轉染子。
1)細胞轉染48h后，將細胞(原樣或稀釋)置于含有適當濃度嘌呤霉素的新鮮培養基中培養。
注意：當細胞處于分裂活躍期時，抗生素作用zuì明顯。細胞過于密集，抗生素產生的效力會明顯下降。zuì好進行細胞分盤使其密度不超過25%。
2)每隔2-3天，移除和更換含有嘌呤霉素的培養基。
3)篩選7天后評估細胞形成的病灶。病灶可能需要額外的一周或者更多時間，這依賴于宿主細胞系和轉染篩選效率。注意：每日進行細胞生長狀態的觀察。嘌呤霉素的篩選至少需要48h，有效濃度嘌呤霉素的篩選周期一般在3-10天。
4)轉移和放置5-10個抗性克隆到一個35mm的培養皿中，用選擇培養基繼續培養7天。此次富集培養是為日后的細胞毒性實驗做準備。

注意事項：
1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2. 嘌呤霉素為有毒化合物，操作時請小心拿放。

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