ALH331 TA克隆試劑盒

產品簡介
TA克隆試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于科研試驗,TA克隆試劑盒是我司眾多優質克隆與表達之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括TA克隆試劑盒(不含多克隆位點)(拓撲連接酶技術)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:TA克隆試劑盒(不含多克隆位點)(拓撲連接酶技術)
英文名稱:Zero Background TOPO TA Clo
產品貨號:ALH331
產品規格:20次|80次
本試劑盒和傳統的T4連接酶原理不同,它根據用拓撲異構酶可以在瞬間(幾秒鐘-幾分鐘)、(接近)連接DNA片段的原理,采用本公司獨特的工藝制成。
試劑盒組份(20次):
TOPO-Ta Simple Vector(30ng/μl)—————20μl
1000bp Control(30ng/μl)————5μl
10×Enhancer———————————20μl
產品特點:
1. 可以在瞬間(幾秒鐘-幾分鐘)完成連接。
2. 無需冰浴和熱休克,室溫5分鐘內完成轉化;無需1小時復蘇,只需37℃10分鐘復蘇便可以涂板。從連接到涂板只需15-20分鐘。
3. 無自連、零背景,無需繁瑣藍白斑篩選,見到長出的克隆便是有插入的(接近)。
4. 可以連接長達10kb片段(即使連接5kb片段,挑10個菌落,至少8個是有插入的),是目前上zuì簡單、zuì快速、零背景免篩選的TOPO TA克隆載體。
儲存條件:-20℃,有效期12個月。
本制品別名:TA克隆載體連接試劑盒
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名稱:DNA粘轉平試劑盒
貨號:BTN60107
規格:20次
本產品利用Pfu DNA polymerase所具有3′到5′的聚合酶活性和5′到3′外切酶活性,將3′或5′突出的DNA片段轉化成平末端,用于克隆工作。
產品特點:
1. 簡單,精心優化過的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要單獨準備。
2.適用于任何平末端的DNA載體。
產品組成:
| 成分 | 規格 |
| Pfu DNA Polymerase(3U/μL) | 20μl |
| 2×Polishing Buffer | 0.5ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。
使用方法:
1. DNA片段的準備:
無論是來源Taq,Tth,T7,Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段,還是用限制性內切酶制備的DNA片段,粘轉平之前均需要將DNA沉淀以便去除反應液中的無關成份。沉淀DNA的方法包括經典的鹽/純沉淀法,離心柱DNA 吸附法和百奧萊博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 設置粘轉平(Polishing)反應:
|
在一個干凈的離心管中,分別加入 | |
| 3′或5′突出的DNA片段 | 10-500ng |
| 2×Polishing Buffer | 25μL |
| Pfu DNA polymerase | 1μL |
| 補水到 | 50μL |
| 72℃保溫2小時。 | |
注意:如果不使用熱蓋式PCR 儀器加熱,則需要在反應管中再加入適量液體石蠟以防反應過程中水份蒸發。
3.反應后處理
粘轉平反應后,樣品可以放-20℃長期保存,也可以直接用于T4 DNA連接酶催化的連接反應。對10μL的連接反應體系,一般需要加入1-2μL粘轉平反應液。由于Pfu DNA polymerase在連接反應的溫度條件下幾乎沒有活性,所以不必去除。但文獻報道,去除后連接效率更高。

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