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產(chǎn)品詳情

ALH091 大型質(zhì)粒大量提取試劑盒

  • 產(chǎn)品/服務:ALH091 大型質(zhì)粒大量提取試劑盒
  • 型 號:ALH091
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-04-03
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):904
產(chǎn)品簡介

北京百奧萊博供應的大型質(zhì)粒大量提取試劑盒用于生化實驗研究等領(lǐng)域,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價位合理,需要大型質(zhì)粒大量提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶,請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

產(chǎn)品詳細介紹

特別提示:包括大型質(zhì)粒大量提取試劑盒(>10kb質(zhì)粒)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:大型質(zhì)粒大量提取試劑盒(>10kb質(zhì)粒)
英文名稱:Large Plasmid Extraction Kit(for cell transfection)
產(chǎn)品貨號:ALH091
產(chǎn)品規(guī)格:20次

本試劑盒適用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型質(zhì)粒制備。常規(guī)的離心柱型質(zhì)粒抽提試劑盒并不適用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型質(zhì)粒DNA的抽提。這主要是因為大型質(zhì)粒DNA分子量很大,常常會超過100kb而且一般拷貝數(shù)低產(chǎn)量低,使用常規(guī)的離心柱吸附膜吸附效率和產(chǎn)量很低而且過膜會打斷這些大分子量的質(zhì)粒DNA。本試劑盒采用改進堿裂解法從培養(yǎng)菌中提取質(zhì)粒DNA,采用獨特的溶液配方和內(nèi)毒素清除試劑,只需要幾次簡單離心去除蛋白質(zhì)、多糖、內(nèi)毒素、RNA等雜質(zhì),獲得高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。純化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的質(zhì)粒可直接應用于細胞轉(zhuǎn)染甚至動物體內(nèi)實驗等對DNA純度要求很高的工作中。純化后期過程均在Eppendorf管中操作,方法簡單,不需特殊設備,無需過柱,不用酚氯fǎng抽提;基本可完全回收細菌裂解釋放出的質(zhì)粒,不必擔心質(zhì)粒DNA的丟失。本方法提取純化質(zhì)粒DNA,對質(zhì)粒損傷小,即使是10kb甚至100kb以上的大型質(zhì)粒或型BAC/PAC質(zhì)粒,只要堿裂解法能夠提取,就可以有效純化。此外溶液型的試劑可以按照比例放大縮小進行小提/中提/大提,zuì后可選擇任意小體積溶解質(zhì)粒,濃度可高達3μg/μl。

試劑盒組份(20次):
RNaseA(10mg/ml)-————————1.3ml
溶液P1—————————————130ml
溶液P2—————————————100ml
溶液PⅢ-————————————110ml
雜質(zhì)清除劑A-——————————3ml
雜質(zhì)清除劑B-——————————30ml
內(nèi)毒素清除劑——————————10ml

試劑盒特點:
1.不需要使用有毒的苯酚,氯fǎng等試劑,也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、從150-200 ml大腸桿菌LB((Luria-Bertani)培養(yǎng)液中,可快速提取0.4-1mg純凈的高拷貝質(zhì)粒DNA,提取率達80-90 %。
2.獲得的質(zhì)粒產(chǎn)量高,超螺旋比例高,純度好,可直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、體外轉(zhuǎn)錄、測序等各種分子生物學實驗。
3.內(nèi)毒素含量低(<0.1 EU/μg DNA),可直接應用于細胞轉(zhuǎn)染。

注意事項
1. 提取的質(zhì)粒量與細菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10kb 的大質(zhì)粒,應加大菌體使用量,同時按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大質(zhì)粒時操作動作要輕柔,應該使用剪大了開口的吸頭,防止機械剪切對DNA 的損壞。
3. DNA 沉淀液沉淀離心后,可能看不到明顯沉淀。如未見沉淀,擔心DNA 丟失,可保留上清液,待完成全部操作后電泳鑒定,以確定是否獲得終產(chǎn)物(數(shù)百微克DNA 離心沉淀在管的側(cè)壁上,可能無法看到明顯團塊)。
4. 得到的質(zhì)粒DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1 相當于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶,也可能為2 條或者多條DNA 條帶,這主要是不同程度的超螺旋構(gòu)象質(zhì)粒泳動位置不一造成,與提取物培養(yǎng)時間長短、提取時操作劇烈程度等有關(guān)。本公司產(chǎn)品正常操作情況下基本超螺旋可以超過95%。
5. 質(zhì)粒DNA 確切分子大小, 必須酶切線性化后,對比DNA 分子量Marker 才可以知道。處于環(huán)狀或者超螺旋狀態(tài)的質(zhì)粒,泳動位置不確定,無法通過電泳知道確切大小。

儲存條件:室溫,有效期18個月。

本制品別名:大型質(zhì)粒提取試劑盒|大型質(zhì)粒大量制備試劑盒|無內(nèi)毒素大型質(zhì)粒提取試劑盒|轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒大量提取試劑盒|細胞轉(zhuǎn)染用大型質(zhì)粒制備試劑盒|BAC大型質(zhì)粒提取試劑盒|PAC大型質(zhì)粒提取試劑盒|P1大型質(zhì)粒提取試劑盒|Cosmid大型質(zhì)粒提取試劑盒

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貨號 名稱 規(guī)格
BTN130938 痰液采集器 1個
BTN60805 中草藥DNA提取試劑盒 20次
BTN60806 一步式細菌DNA提取試劑盒 50次
WE0166 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒 50次
WE0178 細菌基因組DNA提取試劑盒 50次
ALH128 大量組織細胞DNA提取試劑盒 20次|50次
RFT035 動物組織細胞DNA提取試劑盒 50次|100次


關(guān)注大型質(zhì)粒大量提取試劑盒(>10kb質(zhì)粒),無內(nèi)毒素大型質(zhì)粒提取試劑盒,細胞轉(zhuǎn)染用大型質(zhì)粒制備試劑盒,大型質(zhì)粒提取試劑盒,P1大型質(zhì)粒提取試劑盒,轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒大量提取試劑盒,PAC大型質(zhì)粒提取試劑盒,Cosmid大型質(zhì)粒提取試劑盒,大型質(zhì)粒大量制備試劑盒,BAC大型質(zhì)粒提取試劑盒的同時,為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品:



名稱:土壤腐殖酸清除劑
貨號:BTN70603
規(guī)格:250mL
土壤和湖海沉積物中都含有棕黑色或黑色的腐殖酸,它們對PCR等后續(xù)反應有大的抑制作用,所以有效去除土壤中腐殖酸是提取土壤微生物DNA的重要環(huán)節(jié)。但是目前市場上沒有專門的產(chǎn)品,針對這一情況,百奧萊博開發(fā)了本產(chǎn)品,專門用于對提取DNA用的土壤進行預處理,以清除腐殖酸成分。

產(chǎn)品特點:
1. 清除效果好,一次能使腐殖酸的濃度降低50%左右。
2.適合于黃色、紅色、黑色和棕黑色等各種質(zhì)地的土壤和河海沉積物。
3. 操作過程簡單快速,一次處理只需要10分鐘。
4.擴容性好,可小規(guī)模操作,也可以大規(guī)模操作。

儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。

使用及效果:
按每1克土壤加10mL本產(chǎn)的比例將樣品混合,振蕩3~5分鐘,3000-5000g室溫離心5分鐘,棄上清,沉淀可直接用于DNA提取。此操作可以多次重復。
土壤腐殖酸清除劑使用效果
圖注:比較水和本產(chǎn)品處理泥碳(腐殖酸含量大于60%)樣品的效果,C為用水處理后離心得到的結(jié)果,1-5是同一土壤樣品用本產(chǎn)品洗滌1-5后所得到的上清液。
土壤腐殖酸清除劑使用效果
圖注:用我司土壤DNA提取試劑(BTN60701)提取泥碳樣品所得到的DNA溶液,1號樣品所用土壤預先用水洗滌過三次,2號樣品預先用本產(chǎn)品洗滌過三次。

名稱:柱式軟體動物DNA提取試劑盒
貨號:BTN101111
規(guī)格:50次
本試劑盒是專門用于從各種軟體動物組織中提取基因組DNA的試劑盒。其原理是基于陽離子去垢劑CTAB在適當?shù)碾x子強度條件下,特異地跟基因組DNA 結(jié)合形成沉淀,然后在用硅膠膜技術(shù)進行進一步純化。

產(chǎn)品特點:
1.適用于用常規(guī)方法難以提取的、各種富含多糖的軟體動物動物,包括螺類、貝類、烏賊、章魚和蝸牛等。
2. 提取到的基因組DNA 完整性,其中zuì長可以到達長度一般在20-50kb。
3. DNA 純凈,OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右,可直接用于PCR、酶切、雜交等。
4. 操作簡單,整個過程約30分鐘。
5. 安全,本試劑盒對人體,無腐蝕性和刺激性氣味。
6. 價廉物美,與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當,但價格。

試劑盒組成:
成分 規(guī)格
溶液A 50ml
溶液B 50ml
溶液C 100ml
RNase A(10mg/mL) 150μl
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 50ml
DNA洗脫液2.0 10ml
說明書 1份


儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。

使用方法:
1. 勻漿方法一:稱取0.1-0.3g軟體動物組織,轉(zhuǎn)移到塑料研缽中,液氮研磨成粉后轉(zhuǎn)移到一個干凈的1.5mL塑料離心管中。注意:zuì好避免使用含二氧化硅的玻璃研缽,因為DNA 會吸附在表面,影響得率。在離心管中加入1mL 65℃預熱的溶液A并用移液槍頭充分吹打混勻(如果溶液A有沉淀,需先在65℃加熱溶解后搖勻再使用)。進入第三步。
2. 勻漿方法二:將0.1-0.3g軟體動物組織剪成小塊,轉(zhuǎn)移到10-15mL塑料管中(培養(yǎng)細菌那種離心管即可),加入1mL 65℃預熱的溶液A,用Polytron 式勻漿機(剪切式勻漿機)勻漿1分鐘左右。
3. 65℃保溫5-30分鐘,其間zuì好吹打混勻2-3次。
4.轉(zhuǎn)移到新的1.5mL離心管中,12000~15000g室溫離心3分鐘。
5. 將不超過0.75mL的上清轉(zhuǎn)移到新離心管中。有時候上清液中還會有少量細小懸浮物,但對后續(xù)操作沒有影響,不必進行特殊處理。
6.在上清液中加入等體積的溶液B,上下顛倒30秒充分混勻,溶液將呈白色混濁狀。
7. 將其置于冰浴中放置5-10分鐘。
8. 12000~15000g室溫離心3分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的1.5mL塑料離心管中。
9. 加入0.2mL的氯fǎng(自備),震蕩器上充分振蕩30秒混勻。
10. 12000~15000g室溫離心3分鐘,兩相交界面將有白色膜狀物,小心轉(zhuǎn)移上清到新1.5-5mL塑料離心管中。注意:由于下一步要加1.5倍體積的溶液C,所以新的離心管的體積要足夠大。
11. 加入1.5倍體積的溶液C,上下顛倒30秒混勻,然后分多次的將混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。
12. 每次轉(zhuǎn)移0.7-0.8mL 混合液后,室溫放置5-10分鐘。
13. 12000~15000g室溫1分鐘,棄穿透液。
14. 對需要多次上柱的樣品,可以在此將剩余的樣品加到離心吸附柱式中,重復第12-14 步的操作。
15. 將0.7mL 通用洗柱液加入離心柱,室溫離心1分鐘,棄穿透液。
16.在離心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,12000~15000g離心半分鐘(此步為第二次洗滌)。
17. 空甩1分鐘去除殘留液體。
18. 將離心柱放置在一新的1.5mL塑料離心管中,加入30-100μL DNA 洗脫液2.0。
19.室溫放置5分鐘后離心1分鐘,管底即為軟體動物DNA溶液,可立即使用,也可長期保存在-20℃。
20.可以重復上步一次,以洗脫更多的DNA(第二次洗脫的DNA一般有次的30%左右)。

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聯(lián)系人:王欣

電話:18518407031

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