動(dòng)物組織細(xì)胞DNA提取試劑盒的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品，本制品用于科研目的，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要?jiǎng)游锝M織細(xì)胞DNA提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括動(dòng)物組織細(xì)胞DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：動(dòng)物組織細(xì)胞DNA提取試劑盒
英文名稱：Animal tissue cell DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：RFT035
產(chǎn)品規(guī)格：50次|100次

本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)，能提取多種細(xì)胞/組織中的基因組DNA。離心吸附柱可以、專一吸附DNA，可zuì大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。

提取效率：
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液(樣本量10^6～10^7)：5～30 μg
動(dòng)物組織(樣本量30mg)：10～30μg

試劑盒組分;

組份	50次	100次	貯存方式
緩沖液GA	15 ml	30 ml	室溫
緩沖液GB	15 ml	30 ml	室溫
去蛋白液GD(濃縮液)	18 ml	36 ml	室溫
漂洗液PW(濃縮液)	25 ml	25ml	室溫
洗脫緩沖液EB	15 ml	15 ml	室溫
蛋白酶K(20 mg/ml)	1ml	2×1ml	-20℃
RNase A(10 mg/ml)	0.5 ml	1 ml	-20℃
吸附柱CG	50個(gè)	100個(gè)	室溫
收集管(2 ml)	50個(gè)	100個(gè)	室溫
說明書	1份	1份

準(zhǔn)備工作：
1. 準(zhǔn)備55℃和70℃水浴；無水乙醇；1.5ml滅菌離心管。
2. 按照標(biāo)簽所示在去蛋白液GD和漂洗液PW中加入無水乙醇，混勻后蓋緊瓶蓋后室溫貯存?zhèn)溆谩?br /> 3. 每次使用前請檢查緩沖液GA，緩沖液GB和去蛋白液GD是否有沉淀生成，如果出現(xiàn)沉淀，37℃溫浴至沉淀溶解后再使用。

操作步驟：
如非指出，所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

1、處理材料：
a. 培養(yǎng)細(xì)胞：貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)先處理為細(xì)胞懸液(如用PBS緩沖液或類似緩沖液)，10,000 g離心1分鐘，倒盡上清，加入200μl緩沖液GA，振蕩至徹底懸浮。
b. 組織：取約30mg動(dòng)物組織(脾組織用量應(yīng)少于10 mg)加入到事先盛有200μl 緩沖液GA的1.5ml離心管中，用研磨杵徹底將組織研碎。
2、加入20μl蛋白酶K (20 mg/ml)溶液。
a. 提取細(xì)胞基因組時(shí)，加入蛋白酶K混勻后，55℃放置5-10分鐘。
b. 提取組織基因組時(shí)，加入蛋白酶K混勻后，在55℃放置，直至組織溶解。
注：不同組織裂解時(shí)間不同，通常需1-3小時(shí)即可完成(鼠尾需要消化過夜),期間間歇顛倒混勻樣品。
3、加入10μl RNaseA(10 mg/ml)溶液，混勻后室溫放置2分鐘。
4、加入220μl緩沖液GB，充分顛倒混勻，70℃放置10分鐘，溶液應(yīng)變清亮，簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。
注：加入緩沖液GB時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生白色沉淀，一般70℃放置一段時(shí)間后會(huì)消失。如溶液未變清亮，說明細(xì)胞裂解不徹底，會(huì)影響DNA的純度和得率，而且可能導(dǎo)致步驟6中離心柱堵塞。
5、加入220μl 無水乙醇，顛倒混勻，簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。
注：加入乙醇后會(huì)產(chǎn)生絮狀沉淀，可用槍頭反復(fù)抽打1-2次將沉淀弄碎后再上柱。如果絮狀物未做處理，容易導(dǎo)致步驟6中離心柱的堵塞。
6、將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中)，11000g離心2分鐘，倒掉廢液，吸附柱CG放回收集管中。
注：如果出現(xiàn)吸附柱堵塞現(xiàn)象，可將離心時(shí)間延長到5分鐘。
7、向吸附柱CG中加入500μl去蛋白液GD(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，11000g離心1分鐘，倒掉廢液，吸附柱CG放入收集管中。
8、向吸附柱CG中加入700μl 漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，11000g離心1分鐘，倒掉廢液，吸附柱CG放入收集管中。
9、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，11000g離心1分鐘，倒掉廢液。
10、將吸附柱CG放回廢液收集管中，11000g離心2分鐘。
注：此步驟非常重要，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。
11、將吸附柱CG轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加100μl經(jīng)70℃水浴預(yù)熱的洗脫緩沖液EB，室溫放置2分鐘，11000g離心2分鐘。
注意：
a.洗脫緩沖液體積zuì好不少于100μl，體積過小影響回收效率。
b.洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。
12、DNA產(chǎn)物-20℃保存。

儲(chǔ)存條件：室溫，有效期12個(gè)月。

根據(jù)您的關(guān)注的動(dòng)物組織細(xì)胞DNA提取試劑盒，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：



名稱：非凍型尿液DNA保存液
貨號(hào)：BTN90315
規(guī)格：100mL
本品在室溫條件下長期保存用于DNA提取的尿液樣品保存液。它能夠、長期保證DNA分子的完整性。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 保存時(shí)間長，可室溫保存尿液DNA長達(dá)六個(gè)月，尤其適合于野外尿液樣品采集。
2. DNA完整性好，純化后長度在20-50 Kb之間。
3. DNA無化學(xué)修飾，提得的DNA可用于酶切、電泳、Southern雜交和PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
4. 能防止尿液在4℃結(jié)晶。
5. 安全可靠，本產(chǎn)品無害。
6. 使用簡單，直接把新鮮的尿液樣品與本產(chǎn)品混合即可。

儲(chǔ)存條件：室溫運(yùn)輸及保存，有效期兩年。

使用方法：(以DNA提取為例)
1. 迅速將尿液與本產(chǎn)品按10:1的比例混合。
2. 常溫閉光保存直到使用。
3. 使用常規(guī)液體DNA提取方法提取DNA即可。推薦使用柱式尿液DNA提取試劑盒(BTN90314)，使用柱式尿液DNA提取試劑盒提取本產(chǎn)品保存的尿樣，兼容性好，提取效率更高。
4. 提取得到DNA可用于酶切、電泳、Southern雜交和PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

名稱：菌體內(nèi)毒素清除劑
貨號(hào)：BTN90901
規(guī)格：200mL
內(nèi)毒素是E.coli細(xì)胞壁的主要成分，傳統(tǒng)的去除內(nèi)毒素的方法是將內(nèi)毒素和DNA一起純化出來，然后再用各種方法去除其中的內(nèi)毒素，操作繁瑣，DNA 回收率低。本產(chǎn)品可以直接把E.coli 表面的內(nèi)毒素去除，從根本上避免了內(nèi)毒素對后續(xù)操作(如質(zhì)粒DNA提取，重組蛋白質(zhì)提取)的污染。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 個(gè)在菌體收集階段去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品，從源頭上避免了內(nèi)毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸，從根本上防止了可能產(chǎn)生的污染。
2. 操作簡單快速，用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細(xì)菌表面的內(nèi)毒素，只需要10分鐘左右時(shí)間，不需要復(fù)雜儀器設(shè)備。
3.，能去除99%以上的內(nèi)毒素。
4.跟各種質(zhì)粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質(zhì)提取等操作兼容，DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA 丟失率可以高達(dá)50%)。
5. 不影響DNA和大部分蛋白質(zhì)的活性，處理過的質(zhì)粒DNA可用于轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
6. 既可小規(guī)模使用(在1.5mL離心管內(nèi))，也可放量用于大規(guī)模無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取和無內(nèi)毒素蛋白質(zhì)純化。

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

使用方法：

一：用于菌液小于3mL的樣品
1. 收集1.5-3mL E.coli 飽和菌液，12000rpm離心1分鐘，棄上清，得到細(xì)菌沉淀。
2. 加入1mL 本產(chǎn)品溫和混勻后10,000-12000rpm離心1分鐘，棄上清(含內(nèi)毒素)。
3. 再重復(fù)上述操作3-4次，得到的菌體可以直接進(jìn)入后續(xù)的無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取或無內(nèi)毒素蛋白質(zhì)提取程序。

二：用于菌液多于3mL的樣品
整個(gè)操作同上，只是在15或50mL塑料離心管中進(jìn)行，離心速度不能超過離心管的承受力，本產(chǎn)品的用量按比例增加。

疑難解答：
Q:為何用常規(guī)的方法很難去除生物樣品中的內(nèi)毒素?
A:因?yàn)閮?nèi)毒素帶電性跟DNA和部分蛋白質(zhì)相同，所以基于帶電性的分離方法(如硅膠膜吸附，離子交換吸附)不能將它們分開;同時(shí)內(nèi)毒素又是雙性分子(類似于細(xì)胞膜的磷脂分子)，能夠形成大小不等的聚合物，跟質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)大小接近，所以基于分子量大小的分離方法(如凝膠排阻過濾和氯化銫超速離心)也不能將其有效分離。

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