Turbo化學感受態細胞是高品質的克隆與表達產品，由北京百奧萊博供應，本產品僅用于生物化學研究方面，Turbo化學感受態細胞是我司眾多優質克隆與表達之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括Turbo化學感受態細胞在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：Turbo化學感受態細胞
英文名稱：Turbo Chemically Competent Cell
產品貨號：MQ0022
產品規格：10×100μl/50×100μl

Turbo菌株是生長zuì快的大腸桿菌菌株。平板上6.5小時可見克隆，營養液中搖菌4-6小時可提取質粒，缺失核酸內切酶(endA)，提高了質粒DNA的產量和質量；Turbo菌株可嚴格控制laclq的表達，可以克隆毒性基因；fhuA2突變賦予Turbo菌株對噬菌體T1的抗性；lacZΔM15的存在使Turbo可用于藍、白斑篩選。Turbo感受態細胞經特殊工藝制作，pUC19質粒檢測轉化效率>5×108 cfu/μg DNA。
保存條件：-80℃
基因型：
F"proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB)glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10)TetS endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
操作說明：
1.Turbo感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3.向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基(SOC或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4.5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的SOC或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養6.5小時以上。
注意事項：
1.感受態細胞zuì好在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2.混入目的DNA時應輕柔操作。
3.轉化高濃度的質粒或率的連接產物可相應減少zuì終用于涂板的菌量。

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名稱：cl857 Sam7 λDNA(非甲基化)
貨號：BTN90407C
規格：5μg
本產品Lambda DNA(λDNA)為λ噬菌體中的DNA，是一種常見的DNA底物，分子量為31.5×106Da/48502bp，濃度為200～500μg/ml。A型為普通Lambda DNA。B型為不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型為非甲基化的cl857 Sam7 λDNA，是從感染的大腸桿菌GM119菌株中分離得到的。該菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作為對DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。

儲存溶液：Tris-HCl(pH8.0)10mM；EDTA 1mM

儲存條件：低溫運輸、-20℃保存、有效期一年。

純度：
1. OD260nm/280nm＞1.8。
2. 瓊脂糖凝膠電泳出現清晰單一條帶。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保溫16小時后，瓊脂糖凝膠電泳時出現清晰單一條帶。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃，2小時)后，在瓊脂糖凝膠電泳時出現8條清晰的DNA電泳帶。

名稱：大腸桿菌BL21(DE3)化學感受態細胞
貨號：BTN90505
規格：0.1mL*10
本產品是大腸桿菌BL21(DE3)菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。使用pUC19質粒檢測本產品，轉化效率可達107。BL21(DE3)菌株適合表達非毒性蛋白。
該感受態細胞用于以T7 RNA聚合酶為表達系統的外源基因的蛋白表達宿主。T7噬菌體RNA聚合酶基因的表達受控于λ噬菌體DE3 區的lacUV5啟動子，該區域整合于BL21的染色體上。
菌株基因型為：F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3)

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養基等。

使用方法：
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μL，可以根據實際情況分裝使用。
以下實驗以50μL感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB 固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。

注意事項：
1. 涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA 總量較多，可取少量轉化產物涂布平板；若轉化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少，可通過離心(4,000rpm，2分鐘)后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2. 新制備的固體培養基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。

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