富含GC PCR Buffer是高品質的核酸擴增(PCR)產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于生化實驗研究等領域，我公司的富含GC PCR Buffer品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括富含GC PCR Buffer在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：富含GC PCR Buffer
英文名稱：GC-rich PCR Buffer
產品貨號：YT377
產品規格：2ml

本品提供了4種不同的GC-rich PCR Buffer，為擴增高GC含量的DNA片段提供了多種不同的選擇，大大提高了高GC含量DNA片段的擴增成功率。

本套裝提供的Buffer可以單獨使用，也可以組合使用。這樣可以在更多條件下優化PCR條件。

提供了推薦的幾種經過優化的GC-rich PCR Buffer的組合方式，便于用戶直接選用。

根據相關文獻報道，單一的GC-rich PCR Buffer對于某一個高GC含量的DNA片段的擴增效果很好，但對于另外一個高GC含量的DNA片段則很可能會擴增效果不太理想。正因為很難采用一種通用的GC-rich PCR Buffer 完成對于不同的高GC含量DNA片段的擴增，因此對于高GC含量DNA片段的擴增一直是分子生物學操作過程中的一個難點。針對這一實際情況，我司推出了可以給予用戶多種條件進行優化組合的4管套裝GC-rich PCR Buffer。

本GC-rich PCR Buffer可以適用于各種常見的耐熱DNA 聚合酶例如Taq DNA polymerase、Pfu DNA polymerase等。

產品組份：
5×GC-rich PCR Buffer A————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer B————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer C————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer D————0.5ml

注意事項：
1）在使用本試劑盒提供的GC-rich PCR Buffer的同時，必須同時使用和DNA聚合酶配套的zuì終濃度為1×的含鎂離子PCR Buffer。
2）由于PCR反應非常靈敏可以擴增目的基因序列超過1000萬倍，在操作時請注意避免微量待擴增DNA的污染，并盡量考慮設置不加模板的空白對照以確認是否有待擴增DNA的污染。

儲存條件：-20℃。

根據您的關注的富含GC PCR Buffer，高GC含量PCR優化套裝，GC PCR優化試劑盒，高GC含量PCR Buffer，富含GC PCR緩沖液，您可能還對以下產品有需求：



名稱：25mM氯化錳溶液(PCR級MnCl2溶液)
貨號：BTN130307
規格：5mL
本產品為專門用于易錯PCR的MnCl2水溶液，濃度為25mM，可用于調節MnCl2的zuì佳濃度。由于Mg2+在PCR過程中可以穩定非互補的堿基對，Mn2+能夠降低聚合酶對模板的特異性，因而調整兩種離子的濃度，可獲得不同突變頻率的多樣性文庫。

氯化錳分子量為125.8，CAS號為7773-01-5，水合氯化錳外觀為玫瑰色單斜晶體；無水氯化錳外觀為桃紅色結晶。密度為2.977g/cm3。熔點是650℃。在高于熔點溫度下升華。沸點1190℃。易溶于水，溶于醇，不溶于醚。

儲存條件：低溫運輸、-20℃保存，有效期一年。

名稱：雙酶一管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)
貨號：BTN91202
規格：50次
本產品是經過精心優化的、基于MMLV 逆轉錄酶和Taq DNA聚合酶的雙酶一管式RT-PCR試劑盒，它含有除模版RNA和其專一性引物以外的所有RT-PCR試劑，包括MMLV 逆轉錄酶、Taq DNA聚合酶、RT-PCR緩沖液等，可以在同一反應管內完成RNA→cDNA→PCR反應(RT-PCR反應)。

產品特點：
1.一管式完成RT-PCR反應，避免樣品交叉污染。
2. 即開即用，用戶不需要單獨準備RT-PCR所需的各種試劑。
3. 主要成分只有兩個RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix，將加樣步驟減少到zuì低，大降低了加樣誤差，增加了可重復性。
4. 使用范圍廣，適用于從病毒RNA 到人RNA的各種RNA 模板。
5.高靈敏度，每個RT-PCR 體系zuì低可以檢測200拷貝的RNA分子，可擴增的模版RNA的zuì長達2000nt。
6. 所得RT-PCR產物可以直接用于AT克隆。

試劑盒組成：

成分	規格
雙酶一管式RT-PCR Buffer(2×)	750μl
MMLV-Taq Mix	100μl
RNase-free水	1ml
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：所有離心管用前zuì好全部短暫離心幾秒使管壁上溶液沉淀到管底。下面以一個30μL 體系的RT-PCR 為例，如果體積不同，各成分用量需要適當調節。
1.在一干凈的無RNase的PCR管中，先加入下列成分：

成分	陰性對照	樣品
RNA模板(自備，分下面三種情況)	無	見下
總RNA	無	100-500ng
或poly(A)mRNA	無	10-500ng
或體外轉錄得到的專一RNA	無	0.01 pg-500ng
RNA特異性引物一(自備)	終濃度300nM	終濃度300nM
RNA特異性引物二(自備)	終濃度300nM	終濃度300nM
探針(僅對Realtime RT-PCR)	終濃度200nM	終濃度200nM
RNase-free水	補到13μL	補到13μL
雙酶一管式RT-PCR Buffer(2×)	15μl	15μl
MMLV-Taq Mix	2μl	2μl

注：通常初次使用本試劑時，可用引物濃度300nM，探針濃度200nM進行實驗，根據實驗結果具體情況，在200～800nM 范圍內調整引物濃度，在50～400nM 范圍內調整探針濃度以達到zuì佳檢測效果。引物、探針、待檢樣品的具體加量用戶可以根據實際情況調整，同時增減DEPC 水用量，保證總反應體積不變即可。
2. 輕柔混合均勻后放入PCR 儀中進行RT-PCR。
3. 設定RT-PCR反應條件時，一般將RT的條件設定成42℃，30 鐘，后接94℃變性5分鐘，然后進入PCR循環(PCR參數將根據自備引物的Tm 值由用戶自行決定注)、zuì后72℃，5分鐘。對Realtime PCR，在復性步驟設置熒光檢測，檢測通道：FAM/HEX/VIC/ROX/CY5
4. RT-PCR結束后取5-10μL電泳檢查。

注意事項：
1. 使用已校準的移液器，選用一次性PCR反應管、離心管、tip 頭等進行樣本處理及配液等操作，所有用具應不含DNA酶和RNA酶。
2.引物、探針設計過程中應盡可能避免發夾結構、二聚體等現象的發生，探針的位置盡可能靠近上游引物，PCR 目標片段zuì好小于200bp，盡可能在150bp以內。
3. 實驗樣品盡可能新鮮，提取過程應嚴防RNA酶污染及操作不當導致的RNA 降解。
4. 使用本產品時建議對RT-PCR擴增條件、引物濃度和樣品用量進行調整，選擇zuì適當的引物濃度、樣品濃度和PCR擴增條件。
5. 本產品使用前應在室溫充分融解，并用漩渦震蕩器充分混勻。
6. 統一配液后分裝以減少加樣誤差，每次實驗應設置陰性對照。
7. 禁止標記PCR反應管，避免外源性熒光信號干擾。
8. PCR反應管中不能有氣泡，否則會產生非特異的熒光信號。若有氣泡，可先用手指將氣泡彈破，然后再低速離心消除。
9. 實時熒光PCR 儀器連續進行實驗時，zuì好間隔一小時以上再使用。
10. 實時熒光PCR 儀需經常校正和清潔載樣板板孔。
11. 若使用Roch LightCyclerTM熒光PCR 儀，應將毛細管放在專門套管中，以便分裝反應體系和加入待檢樣品。前述操作完畢應低速離心數秒再將毛細管垂直緩慢放入樣品架，以免折斷；若發生折斷，應小心取出，用專用小毛刷擦拭干凈后方可進行擴增。
12. 實驗室應嚴格分區，避免PCR產物污染。

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