2×Pfu PCR Master由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研試驗(yàn)，我公司專注于核酸擴(kuò)增(PCR)產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的2×Pfu PCR Master質(zhì)量可靠，批間差小，且價(jià)格公道，熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)
產(chǎn)品貨號(hào)：QN0968
產(chǎn)品規(guī)格：1ml|5ml

PCR MasterMix包含三種酶(Taq，Pfu，Taq plus)，每種酶對(duì)應(yīng)著兩種PCR MasterMix(含染料和不含染料)，一共六種PCR MasterMix。

Taq：擴(kuò)增效率zuì高的耐熱DNA聚合酶，其擴(kuò)增速度約為1-2kb/min。擴(kuò)增堿基出錯(cuò)率為10-5左右。其產(chǎn)物未端帶有A，可直接用于TA克隆。

Pfu：目前保真度zuì高的耐熱DNA聚合酶，堿基出錯(cuò)率為10-6，但擴(kuò)增效率低于Taq酶，一般能很好的擴(kuò)增2kb以下的片段。其擴(kuò)增速度約為500bp/min左右。其產(chǎn)物為平未端，須加A后才可用于TA克隆。

Taq Plus：Taq和Pfu的等比混合物。集擴(kuò)增效率高和保真度好于一身。擴(kuò)增效率比Pfu高，保真度比Taq好。其擴(kuò)增速度約為1000bp/min左右。其產(chǎn)物未端帶有A，可直接用于TA克隆。

染料PCR MasterMix反應(yīng)完后可以直接電泳檢測(cè)。不含染料的PCR MasterMix反應(yīng)完后加入上樣緩沖液后電泳檢測(cè)。

別名：2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)
英文名稱：2×Pfu PCR MasterMix (不含染料)
儲(chǔ)存條件：-20
性狀：液體

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名稱：PCR級(jí)綠如藍(lán)DNA染料
貨號(hào)：BTN70909
規(guī)格：0.1mL
第二代的非飽和型熒光染料(如SYBR Green I)在高濃度下會(huì)抑制熒光PCR，所以反應(yīng)重復(fù)性很不穩(wěn)定，并且不能用于要求嚴(yán)格的Tm分析。本產(chǎn)品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一樣，是第三代飽和型熒光染料，在飽和濃度下也不抑制熒光PCR反應(yīng)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 飽和濃度不抑制PCR反應(yīng)，因此得到的熒光信號(hào)更強(qiáng)。
2. 抗水解、抗熱解和抗光解的能力強(qiáng)于目前zuì常用的SYBR Green I。
3. 飽和濃度下染料分子沒有機(jī)會(huì)在DNA分子間發(fā)生移位，因此熒光強(qiáng)度跟DNA變性程度呈線性關(guān)系，可以用于精細(xì)的Tm 測(cè)定實(shí)驗(yàn)，如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 儀器(包括iCycler、LightCycler、ABI 測(cè)序儀)兼容。激發(fā)和發(fā)射光譜跟FAM和SYBR Green I 接近，可以使用SYBR Green I的光學(xué)設(shè)置參數(shù)。
5. 不能滲透進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，毒性和致突變性遠(yuǎn)低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲線分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛細(xì)管電泳等研究。

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸、-20℃避光保存，有效期一年。

使用方法：
先將本產(chǎn)品放置在室溫融化，然后震蕩10秒鐘，短暫離心后待用。下面以50μL的標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)體系為例說明其使用：

1.在一干凈的PCR 管中，加入下列成分：

試劑	加入量
10×PCR Buffer(No Mg2+)	5μl
MgCl2 50mM	2.5μl
dNTP 10mM	1μl
本產(chǎn)品(PCR級(jí)綠如藍(lán)染料)	2.5μl
Taq DNA聚合酶	1-5U
DNA模板	適量
PCR引物	5-50 pmol each
補(bǔ)水到	50μl

2. 放入熒光PCR 儀中進(jìn)行qPCR，并在退火或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)記錄熒光信號(hào)。使用的光學(xué)參數(shù)可以跟FAM或SYBR Green I 完全一樣。

注意事項(xiàng)：
1. 如果使用iCycler，可以不加FAM；如果使用ABI系統(tǒng)，需要在Well Inspector選項(xiàng)下的非特異參照中選擇“無”；使用LightCycler時(shí)，zuì好在PCR 體系中再加入終濃度為0.5mg/mL的BSA以降低儀器對(duì)染料和模板的非特異吸附。
2. 如果使用化學(xué)修飾過的Taq DNA聚合酶，可能需要減低KCl的濃度并提高Tris的濃度。

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