SV0435 Hpy99I限制性內切酶

產品簡介
Hpy99I限制性內切酶由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科學研究,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多Hpy99I限制性內切酶等工具酶產品請聯系我司咨詢訂購。...
產品詳細介紹
特別提示:包括Hpy99I限制性內切酶在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:Hpy99I限制性內切酶
英文名稱:Hpy99I Restriction Endonuclease
產品貨號:SV0435
產品規格:500U|100U
在不同反應緩沖液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 10%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重組酶。
反應條件:
CutSmart 緩沖液,37℃。
熱失活:65℃ 20 分鐘。
濃度:
2,000units/ml。
甲基化敏感性:
對哺乳動物基因組DNA CpG甲基化敏感。
注意事項:
建議溫育時間不>4 小時。
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
| WE0212 | 蛋白酶K | 100mg |
| SV0073 | AvaII限制性內切酶 | 10KU|10KU|2KU|1KU |
| SV0218 | BspQI限制性內切酶 | 2500U|500U |
| SV0577 | PacI限制性內切酶 | 1250U|250U|125U |
| SV0588 | PflMI限制性內切酶 | 5KU|1KU|500U |
| SV0765 | Tth111I限制性內切酶 | 2KU|400U|200U |
| SV0773 | XbaI RE-Mix限制性內切酶 | 150次 |
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名稱:T4聚核苷酸激酶
貨號:BTN120506
規格:250U
T4聚核苷酸激酶能夠催化ATP的γ-位磷酸基團轉移到寡核苷酸鏈(雙鏈或單鏈DNA或RNA)的5′-羥基末端以及3′-單磷酸核苷上。本產品還具有3′磷酸酶活性,將3′-磷酸基團從寡核苷酸的3′磷酸末端、脫氧3′-單磷酸核苷和脫氧3′-二磷酸核苷上水解掉。其反應示意圖如下:

產品用途:
1.DNA或RNA的末端標記,用作寡核苷酸探針和進行DNA測序。
2.寡核苷酸5′末端的磷酸化,以便進行連接反應。
3.除去3′磷酸基團。
產品組成:
| 成分 | 規格 |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 25μl |
| 10×反應緩沖液 | 1ml |
| 說明書 | 1份 |
儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
活性定義:1 單位指在37℃條件下,30分鐘內催化 1nmol 酸不溶性 [32P] 摻入所需要的酶量。
1×反應緩沖液:[70mM Tris-HCl(pH7.6@25℃),10mM MgCl2,5mM DTT],37℃溫育。
熱失活:65℃加熱20分鐘。
來源:重組E.coli菌株,克隆有T4多聚核苷酸激酶或修飾的T4多聚核苷酸激酶基因。
自備試劑:0.5M EDTA(pH8.0)、[γ-32P或γ-33P]-ATP或0.1mM ATP、DNA純化試劑盒。
使用方法:
一、DNA 5′末端標記:
1.參考如下表格設置反應體系:
| 待磷酸化DNA | 1~50 pmol(5′末端) |
| 10×反應緩沖液 | 5μL |
| 自備的[γ-32P或γ-33P]-ATP(3000Ci/mmol) | 50pmol |
| 補充無核酸酶的去離子水 | 至48μL |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 2μL |
2.按上表設置好反應體系后,輕輕混勻(可以用移液器吹打混勻或用Vortex在zuì低速度輕輕混勻),隨后離心沉淀液體。
3.37℃孵育30分鐘。
4.加入自備的1μL 0.5M EDTA(pH8.0)混勻,以終止反應。
5.后續可以使用酚氯fǎng抽提、乙醇沉淀等方法純化標記的DNA,也可以使用適當的DNA 純化試劑盒進行純化。DNA純化試劑盒可以向我公司訂購。
二、DNA 5′末端磷酸化:
1.參考如下表格設置反應體系:
| 待磷酸化DNA | 1~50 pmol(5′末端) |
| 10×反應緩沖液 | 5μL |
| 自備的0.1mM ATP | 3μL |
| 補充無核酸酶的去離子水 | 至48μL |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 2μL |
2.按上表設置好反應體系后,輕輕混勻(可以用移液器吹打混勻或用Vortex在zuì低速度輕輕混勻),隨后離心沉淀液體。
3.37℃孵育30分鐘。
4.加入自備的1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混勻,以終止反應。
5.后續可以使用酚氯fǎng抽提、乙醇沉淀等方法純化標記的DNA,也可以使用適當的DNA 純化試劑盒進行純化。
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