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特別提示：包括BmtI-HF限制性內(nèi)切酶在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：BmtI-HF限制性內(nèi)切酶
英文名稱：BmtI-HF Restriction Endonuclease
產(chǎn)品貨號：SV0145
產(chǎn)品規(guī)格：1500U|300U

在不同反應(yīng)緩沖液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1:
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重組酶、基因工程改造酶、省時酶、高保真酶。
反應(yīng)條件:
CutSmart 緩沖液，37℃。
熱失活:65℃ 20 分鐘。
濃度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
對 dam、dcm 和哺乳動物 CpG 甲基化均不敏感。

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BTN131196 Therminator II DNA聚合酶 100U
SV0011 AciI限制性內(nèi)切酶 1KU|200U|100U
SV0080 BaeGI限制性內(nèi)切酶 2500U|500U
SV0127 BfuCI限制性內(nèi)切酶 2KU|400U
SV0236 BssHII限制性內(nèi)切酶 2500U|2500U|500U|250U
SV0242 BssSαI限制性內(nèi)切酶 1KU|200U
SV0286 BtsIMutI限制性內(nèi)切酶 100U
SV0477 MluI-HF限制性內(nèi)切酶 5KU|1KU|500U

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名稱：末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT酶)
貨號：YT512
規(guī)格：500U
本酶是一種模板依賴的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、單鏈或雙鏈DNA的3"羥基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的zuì短長度為3個核苷酸。

用途：寡核苷酸或DNA 3"羥基末端標記；DNA末端加尾(DNA tailing)；5"-RACE；合成同一種脫氧核苷酸的寡聚鏈等。
來源：由大腸桿菌表達，表達基因的來源為小牛胸腺。
活性定義：37℃60分鐘內(nèi)，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3"羥基末端中所需的酶量定義為1個活性單位。
酶活性檢測條件：200mM potassium cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
純度：不含DNA內(nèi)切酶和外切酶，不含RNase。
酶儲存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassium cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。
失活或抑制：70℃加熱10分鐘或加入適量EDTA均可導(dǎo)致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金屬離子螯合劑，較高濃度的銨根離子、氯離子、碘離子和磷酸根均對Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
儲存條件：-20℃。

使用說明：

1. DNA 3’末端標記：
a. 參考如下表格設(shè)置反應(yīng)體系：
待標記DNA————————————————————10 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X) ——————————————10μl
[α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50μCi)
TdT (20U/μl) ——————————————————2μl
補充無核酸酶的去離子水 —————————————至50μl
b. 按上表設(shè)置好反應(yīng)體系后，輕輕混勻(可以用移液器吹打混勻或用 Vortex在zuì低速度輕輕混勻)，隨后離心沉淀液體。
c. 37℃孵育15分鐘。
d. 70℃孵育15分鐘或加入5μl 0.5M EDTA終止反應(yīng)。
說明：標記的效率和3’羥基末端的類型有關(guān)，3’突出末端的標記效率要顯著高于3’縮進末端或平末端的標記效率。

2. DNA末端加尾(DNA Tailing)：
a. 參考下表格設(shè)置反應(yīng)體系：
DNA片段 ————————————————————1 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X)——————————————4μl
dATP or dTTP——————————————————130pmol
或 dGTP or dCTP (四種中通常只需加入一種)————60pmol
TdT (20U/μl)——————————————————1.5μl
補充無核酸酶的去離子水—————————————至20μl
b. 按上表設(shè)置好反應(yīng)體系后，輕輕混勻(可以用移液器吹打混勻或用 Vortex在zuì低速度輕輕混勻)，隨后離心沉淀液體。
c. 37℃孵育15分鐘。
d. 70℃孵育15分鐘或加入5μl 0.5M EDTA終止反應(yīng)。
說明：在上述反應(yīng)條件下，每個3’羥基末端可以加上100-130個dA或dT，或20-30個dC或dG。

3. 其他用途可以參考上述用途或適當?shù)奈墨I資料進行。

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