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產品詳情

BTN121122 柱式探針純化試劑盒

  • 產品/服務:BTN121122 柱式探針純化試劑盒
  • 型 號:BTN121122
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-06-29
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數:1057
產品簡介

柱式探針純化試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科研目的,柱式探針純化試劑盒是我司眾多優質探針標記及檢測之一,質量堪比同類進口產品,價格非常優惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...

產品詳細介紹

特別提示:包括柱式探針純化試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!


產品名稱:柱式探針純化試劑盒
英文名稱:Column Probe Purification Kit
產品貨號:BTN121122
產品規格:10次

本試劑盒是基于分子排阻層析原理的、專門用于純化同位素和非同位素標記的核酸探針的試劑盒。在分子排阻層析過程中,大分子(標記的核酸探針或Oligo探針)將繞過層析介質,快速穿透出層析柱,小分子(未參入的核苷酸)將進入層析介質中,緩慢穿透出層析柱。根據這一時間差而將兩者分開。此過程的示意圖如下:
柱式探針純化試劑盒示意圖

產品特點:
1. 即開即用,提供純化所需要的所有溶液和介質,不需要單獨準備每種試劑,免去用戶自己摸索條件。
2.適用于PCR 標記、隨機引物標記、切口平移和填入法標記。
3. 能去掉大部分的未標記物、鹽離子等小分子。
4. 足夠10次純化使用,每次可以純化50μl的標記反應液。
5.可用于DIG、生物素、Cy3、Cy5等非同位素標記的DNA和RNA探針(由于標記分子帶非性基團,容易進入有機相,因此這些探針不能用傳統的酚lǜ仿抽提-乙醇沉淀法純化)。

試劑盒組成:
成分 規格
Sephadex G50 介質 15ml
0.7mL離心柱及管套 10套
TE溶液 10ml
說明書 1份


儲存條件:常溫運輸及保存,有效期一年。

使用方法:
注意:由于非同位素標記的探針濃度一般都比較低,非常容易吸附到槍頭或離心管的表面,造成探針的損失,因此zuì好使用硅化的離心管和槍頭。

1. 搖晃Sephadex G50介質至均勻,迅速轉移0.5mL 到離心柱中,套上套管(又叫收集管)。
2. 2000rpm室溫離心1分鐘,Sephadex G50介質將壓緊在柱子里面。
3. 倒掉套管中的穿透液,再加0.5mL的搖晃后得到的Sephadex G50 介質,2000rpm室溫離心1分鐘。
4. 經上述步驟會得到體積約為0.5mL 壓緊后的Sephadex G50介質。如不足,再加入少量的G50介質離心,直到體積達到0.5mL左右。倒掉套管中的穿透液。
5.在柱子中Sephadex G50 界面的上面加入50μl TE緩沖液,套上套管,2000rpm室溫離心1分鐘,測量收集管中穿透液的體積。
6. 重復上步3-5次,直到收集管中穿透液的體積跟加入的體積一樣(50μL)。
7. 將50μl的標記探針(必須使用50μl樣品。如果沒有50μl,需要用TE緩沖液或水補足到50μl)加到柱子中Sephadex G50 界面的上面,套上一個自備的(zuì好是硅化的)離心管。
8. 2000rpm室溫離心1分鐘,離心管中的穿透液將含標記探針,未參入的標記物將滯留在介質中。
9.電泳或點雜交檢測探針回收效率后直接使用或放-20℃長期保存。

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BTN121122 柱式探針純化試劑盒 10次
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名稱:TdT加尾法DNA生物素標記試劑盒
貨號:BTN90605B
規格:5次
本試劑盒是基于TdT末端轉移酶能夠在DNA的3′端添加dNTP尾巴的原理而設計,該反應的示意圖如下:
TdT加尾法DNA地高xīn標記試劑盒原理示意圖

產品特點:
1.快速,15分鐘即可完成標記反應。
2. 不但可用于單鏈DNA和DNA Oligo標記,還可用于3′突出的雙鏈DNA標記,但后者標記效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高xīn標記的核苷酸等)。
4. 提供不帶標記核苷酸、帶生物素標記核苷酸和帶地高xīn標記核苷酸三種選擇。
5. 同時提供非標記的dATP,用戶可以用其調節加尾長短和標記核苷酸摻入比例。
6. 標記的探針可用于電泳遷移率實驗(EMSA)、原位雜交(ISH)、Northern Blot(不推薦用于低豐度RNA檢測)、小RNA Northern、Southern Blot(不推薦用于單拷貝基因檢測)、菌落雜交、斑點印跡雜交分析等。

試劑盒組成:
成分 規格
TdT緩沖液,5× 20μl
TdT(末端轉移酶,10U/μL) 10μl
dATP,2mM 5μl
標記核苷酸 (A、B、C不同,見注)
超純水 1ml
說明書 1份

注:A型用于自選標記,用戶需自備標記核苷酸,本產品不提供標記核苷酸;B型提供5μl Biotin-11-dUTP;C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:
1.在0.2mL微量離心管中按下表設置一個20μl體系的標記反應(如果需要標記更多探針,請增加標記體積而不要增加探針DNA的濃度):
成份 用量
探針DNA 100-200 pmol
TdT Buffer,5× 4μl
標記核苷酸,1mM
(A型需自備標記核苷酸)
1μl
dATP,2mM (見下注)
TdT末端轉移酶(10U/μL) 2μl
超純水 補到20μl

注:dATP可以不加,但這樣得到的加尾全部是標記核苷酸,由于空間阻礙,靈敏度不一定zuì佳。如果雜交效果不好,摻入一定比例的dATP到標記核苷酸中,以控制標記的密度,提高比活。具體比例如何可以自己優化。
2. 37℃反應15分鐘,延長到30分鐘也可以。如果沒有非標記核苷酸存在,一般可以加尾3-5個Biotin或DIG標記的核苷酸(標記物空間阻礙抑制延長);如果有在加尾反應中加入一定比例的非標記核苷酸dATP(其他dNTP也可,只是本試劑盒只提供dATP而已),每條探針上可加上約100個核苷酸,平均含5個標記核苷酸
3. 70℃ 10分鐘滅活TdT酶。
4. 如果需要,可以PAGE電泳+銀染(相關試劑需要另購)檢測標記效率,帶標記的探針泳動速度將低于沒標記的探針。
5. 如果是非同位素標記,探針不需純化可以直接用于雜交。如果需要純化非同位素標記的探針,請不要酚/lǜ仿抽提,因為非同位素標記物一般會使探針DNA進入有機相而丟失。
6. 使用時需將探針以1-8 ng/μL的終濃度加入到雜交液中(如果探針是雙鏈DNA,加入前還需熱變性)。如果不立即使用,非同位素標記的探針DNA可-20℃長期放置一年,同位素標記的探針DNA不能放置。

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