拭子基因組DNA提取試劑盒（離心吸附柱法)是高品質的DNA提取純化產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于生化實驗研究等領域，我公司的拭子基因組DNA提取試劑盒（離心吸附柱法)品質上佳，經過多年的開發生產，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括拭子基因組DNA提取試劑盒（離心吸附柱法)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：拭子基因組DNA提取試劑盒（離心吸附柱法)
英文名稱：Efficient Extraction kit for genomic DNA from swab
產品貨號：WH0215
產品規格：50次|200次

本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附膜和獨特的緩沖液系統，離心吸附板中采用的硅基質材料為材料，能夠從口腔拭子、咽拭子以及漱口水等多種口腔樣本中、專一吸附DNA，可zuì大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA片段大，純度高，質量穩定可靠。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作，包括酶切、PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。

試劑盒組成：

組分	50次	200次
組織消化液GHA	30ml	120ml
緩沖液GBS	15ml	60ml
去蛋白液RD	24ml	90ml
漂洗液PWE	25ml	50ml
洗脫緩沖液TB	15ml	30ml
Proteinase K	500μl	2×1ml
吸附柱CB2	50個	200個
收集管（2ml)	50個	200個
離心管（1.5ml)	50個	200個

保存條件：室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存12個月，更長時間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產生沉淀，使用前應將試劑盒內的溶液在室溫放置一段時間，必要時可在37℃水浴中預熱10min，以溶解沉淀。

選配試劑：口拭子樣本保存液（目錄號：WH0214）

注意事項：請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
1．樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的核酸片段較小且提取量降低。
2．若緩沖液GBS中有沉淀，可在室溫中重新溶解，搖勻后使用。
3．如果樣本不能及時提取，可保存在口拭子保存液中（目錄號：WH0214），長期保存不會影響提取效果。

操作步驟
使用前請先在緩沖液GBS中加入異丙醇；在去蛋白液RD和漂洗液PWE中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標簽。

1．處理材料：
1）口腔拭子樣本提取
  將在面頰內擦拭過的拭子轉移到2ml離心管中，加入500μl緩沖液GHA。加入10 μl Proteinase K溶液，渦旋10 sec混勻，65℃放置15-30 min，每隔10min渦旋混勻數次,取出300-350 μl進行后續實驗。
2）咽拭子樣本提取
  將在咽部擦拭過的拭子轉移到5 ml離心管中，加入1 ml-2ml的組織消化液GHA，顛倒混勻。在提取前取出300-350 μl的樣品，加入10 μl Proteinase K溶液，渦旋10 sec混勻，65℃放置30 min，每隔10min渦旋混勻數次。
3）唾液樣本提取
  按照要求取出唾液樣本，加入等體積的緩沖液GHA，顛倒混勻。在提取前取出300-350 μl的樣品，加入10 μl Proteinase K溶液，渦旋10 sec混勻，65℃放置30 min，每隔10min渦旋混勻數次。
  注意：如果樣本已經保存在其他廠家的樣品保存液里，加入樣品1/2體積的組織消化液GHA和10 μl Proteinase K溶液，渦旋10 sec混勻，65℃放置15-30 min，取出300-350 μl進行后續實驗。提取咽拭子樣本和唾液樣本時，若組織消化液GHA不足，需另行購買。
2．加入500μl緩沖液GBS（使用前請先檢查是否已加入異丙醇），充分顛倒混勻，室溫放置5 min。
3．將上一步所得溶液都加入一個吸附柱CB2中（吸附柱CB2放入收集管中），12000rpm（~13400×g)離心30 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB2放回收集管中。
4．向吸附柱CB2中加入500μl去蛋白液RD（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm （~13400×g)離心30 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB2放回收集管中。
5．重復操作步驟4一次。
6．向吸附柱CB2中加入600 μl漂洗液PWE（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm （~13400×g)離心30 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB2放回收集管。
7．重復操作步驟6一次。
8．12000rpm （~13400×g)離心2 min，倒掉廢液。將吸附柱CB2室溫放置數分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
9．將吸附柱CB2轉入一個干凈的離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加50 μl洗脫緩沖液TB，室溫放置2-5 min，12000rpm （~13400×g)離心2 min。
10．將溶液收集到離心管中，并于適當條件保存。

DNA濃度及純度檢測：
·得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。
· DNA應在OD₂₆₀處有顯著吸收峰，OD₂₆₀值為1相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml單鏈DNA。
· OD₂₆₀/OD₂₈₀比值應為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用ddH2O，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。

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