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特別提示：包括HpaII限制性內切酶在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：HpaII限制性內切酶
英文名稱：HpaII Restriction Endonuclease
產品貨號：SV0422
產品規格：10KU|10KU|2KU|1KU

在不同反應緩沖液的活性:
BalbBuffer 1.1:
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重組酶、省時酶。
反應條件:
CutSmart 緩沖液，37℃。
熱失活:80℃ 20 分鐘。
濃度:
10,000和50,000units/ml。
甲基化敏感性:
對哺乳動物基因組DNA CpG甲基化敏感。
注意事項:
Hpall是Mspl的完全同裂酶。
當 KCl 濃度＞50mM 時，酶活性被抑制。

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名稱：M-MLV反轉錄酶II(RNase H-)(逆轉錄酶)
貨號：YT394
規格：2000U|10KU|50KU
本品是一種經過改造和優化的M-MLV反轉錄酶，具有正常的依賴于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性，能夠以RNA或DNA為模板，在引物存在的情況下進行互補DNA鏈的合成，即可以進行cDNA(complementary DNA)的鏈合成。

本產品是zuì常用的反轉錄酶之一，廣泛用于獲得總RNA或mRNA后cDNA條鏈的合成，后續可以用于PCR、real-time PCR也稱定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、cDNA的第二鏈合成以及cDNA文庫的構建等。本品還可以通過反轉錄用于DNA探針的熒光、生物素、dì高辛或同位素標記等，也可以通過引物延伸(primer extention)來分析和研究RNA。

本產品無RNase H活性，反轉錄效率高、產物長度長。本產品與野生型M-MLV反轉錄酶相比，無RNase H活性，不能選擇性剪切RNA和DNA雜合雙鏈中的RNA，從而有助于合成長度更長的cDNA。本產品經測試可以輕松完成長度為8 kb及以下基因的反轉錄(參考圖1)，反轉錄的zuì大長度可以超過10kb。


使用本品反轉錄總RNA后，對于不同長度的cDNA進行PCR擴增后的電泳效果圖。圖中可見對于0.2-8kb的cDNA可以非常地被反轉錄。

本產品熱穩定性高。zuì適反應溫度為42-45℃，但當溫度達到50℃時仍具有很高活性，且可獲得較高產量的cDNA。


在不同溫度下的反轉錄效果。用從NIH3T3細胞抽提獲得的總RNA 500 ng，在20μl的反轉錄體系中按照圖中所示溫度進行反轉錄。反轉錄完成后取1μl反轉錄產品進行目的基因的PCR擴增和電泳。

本品是一種大腸桿菌重組高表達的的反轉錄酶，由于其表達量非常高，大大提高了本產品的。本反轉錄酶含有從Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase基因克隆的缺失RNase H domain的pol基因，并進行了突變優化以提高其熱穩定性、反轉錄效率和表達量。

酶活性定義：One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTTP into acid-precipitable material in 10 min at 37℃ using poly(A)·oligo(dT) 12-18 as template-primer。反應體系為 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT, 0.5mM [3H]-dTTP and 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。

純度：不含DNA內切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以滿足常規反轉錄合成cDNA條鏈等的需要。

酶儲存溶液：20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 300 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.01% NP-40 and 50% glycerol。

失活或抑制：80℃孵育10分鐘可以導致M-MLV反轉錄酶(RNase H-)失活；EDTA、EGTA等螯合劑、無機磷酸鹽或焦磷酸鹽以及聚氨(polyamine)對M-MLV反轉錄酶(RNase H-)有抑制作用。

本產品中M-MLV反轉錄酶(RNase H-)的濃度為200U/μl，用于體積為20微升的反轉錄體系時足夠進行10次反轉錄反應。

儲存條件：-20℃。

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